| 研究課題/領域番号 |
10470217
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
今井 圓裕 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00223305)
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| 研究分担者 |
猪阪 善隆 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
金田 安史 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (10177537)
守山 敏樹 大阪大学, 健康体育部, 講師 (30283815)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 2000
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| キーワード | 遺伝子治療 / TGF-β / 腎炎 / 間質線維化 / アンチセンス / HVJリポソーム法 |
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| 研究概要 |
1.メサンジウム増殖性腎炎モデルである抗Thy-1腎炎モデルラットにおいて、TGF-β受容体-IgG Fcキメラ蛋白発現ベクターを筋肉に遺伝子導入することによる実験腎炎の遺伝子治療を試み、その糸球体硬化病変に及ぼす影響を検討した。抗Thy-1腎炎の糸球体のmRNAレベルはキメラ分子発現ベクター導入群でTGF一βならびにI型コラーゲンのmRNAが抑制されていることが確認された。また、病変惹起7日後の糸球体PAS染色像においても細胞外基質産生が強く抑制されていることが確認された。以上、このキメラ分子発現ベクターをラット抗Thy-1腎炎モデルに導入することにより、筋肉で過剰発現したキメラ分子は腎糸球体に作用しTGF-βによる細胞外基質産生作用を抑制することが確認された。
2.TGF-βが過剰発現し間質細胞や形質転換、線維化に関与していることが報告されている一側尿管結紮モデルを用いて、腎間質線維化に対してTGF-βアンチモンスオリゴによる遺伝子治療法の有効性について検討した。はじめに、改良型HVJリポソーム法によりFITCラベルしたオリゴDNAをラット尿管より逆行性に腎臓へ導入したところ、10分後、すでにFITCラベルしたオリゴDNAが、腎髄質のみならず皮質の間質細胞の核にも集積していることが確認された。次にTGF-βに対するアンチセンスあるいはスクランブルオリゴをラット尿管より逆行性に腎臓へ導入した。TGF-βアンチセンスオリゴの腎間質細胞への導入により、TGF-β,I型コラーゲンmRNAの発現が抑制されるとともに、スクランブルオリゴを導入した群に比し、腎間質の線維化が抑制された。改良型HVJリポソーム法を用いた腎間質細胞へのTGF-βアンチセンスオリゴ導入は、間質線維化に対する遺伝子治療法として有効な方法となりうることが示唆された。
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