| 研究課題/領域番号 |
11671131
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| 研究機関 | 大分医科大学 |
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研究代表者 |
浜口 和之 大分医科大学, 医学部, 講師 (60180931)
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| 研究分担者 |
吉松 博信 大分医科大学, 医学部, 助教授 (00166993)
若菜 茂晴 理化学研究所, ゲノム科学総合研究センター, 研究員 (90192434)
伊奈 啓輔 大分医科大学, 医学部, 助教授 (20203193)
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| キーワード | マウス / 膵β細胞 / Differential display / MIN6 / スピードコンジェニック / NODマウス / cDNA |
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| 研究概要 |
膵β細胞において高発現を示し、グルコースに応答性を示す新規遺伝子、BRG1の構造と機能を解明するのが本研究の目的である。これまでの検討により、以下のことが判明した。
1)BRG1は、マウス膵β細胞やラット膵島で高発現しており、グルゴースに応答して発現の増強する遺伝子である。しかし、感度の高いノーザンブロットによる詳細な解析では、発現はマウスのいろいろな組織で発現されていた。マウス組織での発現は、特に睾丸において高かった。
2)BRG1遺伝子は、約14kbの遺伝子で、BRG1蛋白は約4,400個のアミノ酸から成る。塩基配列データベースからBRG1遺伝子の機能を推定した。アミノ酸は線虫からヒトまで、特にC末端側の半分は動物の種を越えて保存されていた。N末端側から、DNA結合蛋白を示唆するZnフィンガーモチーフ、ATP/GTP結合、インスリン受容体によるリン酸化部位、Tubファミリー(肥満糖尿病マウスTubby関連)、核局在化シグナルといった配列がみられた。また、本研究年度中に、線虫におけるBRG1ホモログの断片についての報告がなされ、カルモジュリン結合蛋白の1つである可能性が報告された。このような構造予測から、BRG1は細胞内においてCaイオンのセカンドメッセンジャーであるカルモジュリンに結合活性を示す蛋白であると考えられる。
3)BRG1はマウス第4染色体の糖尿病感受性遺伝子Idd11に非常に近い領域にマップされた。
4)BRG1の抗原として適当な領域よりペプチドを合成し、家兎に免疫してポリクローナル抗体を作製した。ELISAでは、非常にHigh titerの抗体が得られた。
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