上咽頭癌の頸部転移機構に関する分子生物学的解析

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470358
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 古川 仭 金沢大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40092803)
• 研究分担者: 竹下 元 金沢大学, 医学部附属病院, 助手 (40272976) ; 吉崎 智一 金沢大学, 医学部附属病院, 講師 (70262582)
• キーワード: LMP1 / MMP9 / NF-κB / I-κB / 分子標的治療 / アスピリン

研究概要

上咽頭がんの頸部転移機序を分子生物学的に解明する目的でこれまでにEBウィルスの唯一の発癌遺伝子といわれるLMP1発現と相関する転移関連遺伝子群のスクリーニングをおこなった。その結果、細胞外基質破壊、細胞接着、血管新生、細胞運動能亢進に関与する転移関連遺伝子群が明らかにされた。そこで、昨年度はLMP1の発現抑制のための方略を検討した。その結果、LMP1によるMMP9の発現誘導をI-κBが阻害することを明らかにした。つまり、NF-κBシグナルを抑制することでLMP1によるMMP9の転写が抑制されることを証明した。しかしLMP1遺伝子発現の制御は難しく困難と考え、LMP1下流のシグナル伝達経路を遮断することによって、癌の浸潤・転移を抑制する分子標的治療の可能性について検討を加えることにした。まず最初に、I-κBキナーゼ(IKK)を不活化し、NF-κBの活性を抑制することが知られているアスピリン及びその関連物質であるサリチル酸ナトリウムについて検討した。その結果、アスピリンはLMP1導入後のMMP9の発現を抑制することをゼラチンザイモグラフィーで観察した。ゲルシフトアッセィの実験から、アスピリンはLMP1によるNF-κB、AP-1の活性を抑制したことから、MMP9の発現抑制はLMP1下流シグナル伝達経路の抑制によるものであると考えられた。また、MMP9の転写に関するプロモーターの活性を調べたCATアッセイでも、アスピリンによる抑制が証明された。今後は、ヌードマウスを用いたin vivoの系での実験を勧め、臨床応用への可能性を検討する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Yoshizaki T.: "Promotion of metastasis in nasopharyngeal carcinoma by Epstein-Barr virus latent membrane protein-1"Histol Histopathol.. 17. 845-850 (2002)
• [文献書誌] Yoshizaki T., Sato H., Furukawa M.: "Recent advances in the regulation of matrix metalloproteinase-2 activation : From basic research to clinical implication (Review)"Oncol.Rep.. 9. 607-611 (2002)
• [文献書誌] Wakisaka N., Murono S., Yoshizaki T., Furukawa M., Pagano JS.: "Epstein-barr virus latent membrane protein 1 induces and causes release of fibroblast growth factor-2"Cancer Res.. 62. 6337-6344 (2002)
• [文献書誌] Maekawa K., Sato H., Furukawa M., Yoshizaki T: "Inhibition of cervical lymph node metastasis by marimastat (BB-2516) in an orthotopic oral squamous cell carcinoma implantation model"Clin.Exp.Metastasis. 19. 513-518 (2002)
• [文献書誌] Murono S., Inoue H., Tanabe T., Joab I., Yoshizaki T., Furukawa M., Pagano S.: "Induction of cyclooxygenase-2 by Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 is involved in vascular endothelial growth factor production in nasopharyngeal carcinoma cells"Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 98. 6905-6910 (2001)