| 研究概要 |
DNAは酸素ラジカルによってグアニンが酸化を受けて8-オキソグアニン(GO)になりやすいことが知られているが,その傷害を取り除くために「酸素ラジカル誘発性突然変異の防御機構(GOシステム)」が,好気性生物に種を超えて普遍的に存在すると考えられている.その中で,MutM蛋白質はGO : CペアからGOを取り除く役割を担っている.また,MutY蛋白質は,GOが複製時にGO : Aの対を形成した際にAを除去する酵素である.その他に,酸化されたdGTPのリン酸結合を加水分解してヌクレオチドプールから酸化されたdGTPなどを排除するMutTなどの酵素群も存在する.これら酸化傷害DNA修復系酵素群を、高度好熱菌Thermus thermophilus HB8からクローニングして大腸菌体内で大量発現させ,分子機能解析を行うとともに立体構造解析を行っている.
MutM蛋白質は,通常の酵素分子と異なり,基質のDNAと結合するとドメイン間の角度は,基質と結合していない時よりもより開いた構造をとっていた.また,変異計MutM蛋白質と基質傷害DNAとの酵素反応過程の解析から,基質認識機構や触媒反応機構がより詳細に明らかになった.MutY蛋白質や数種類存在するMutT蛋白質についても、同様の解析を進めている.
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