| 研究概要 |
内在性レトロウイルス(HERV)はゲノム上に散在し、遺伝マーカーとしての有用性のみならず、自己免疫疾患の病態に関与する可能性がある。一方、CpG島におけるシトシン脱メチル化は遺伝子転写活性と関連する。今回、HERV周辺DNAメチル化プロフィールの解析を試みた。メチル化感受性酵素HpaIIで消化したDNAにアダプター付与し、アダプタープライマーとHERV普遍的蛍光プライマー(U5、U3)を用いてsuppression PCRを行い、HERV配列を含むHpaIIフラグメント増幅を行った。メチル化非感受性酵素MspI断片も増幅し、自動シークエンサーで解析した。異なる症例から採取した好中球とリンパ組織を比較したところ、MspI断片は同一であり、MspI/HpaIIによる遺伝多型は検出されなかった。一方、HpaIIパターンは異なっており、DNAメチル化(Epigenetic)の相違によると考えられた。関節リウマチ(RA)の遺伝多型について抗シトルリン抗体産生に重要なシトルリン化酵素を明らかにしたが、メチル化との関連は不明である。一方NF-κBは,RAに関連した炎症性サイトカイン遺伝子活性化に重要な転写因子である。新規N-κB阻害剤薬に関する研究ではIKK阻害薬として同定された化合物の中から、RA滑膜細胞のサイトカイン遺伝子の転写を抑制する化合物を選択した。この化合物はin vitroにおいてRA滑膜細胞のNF-κBの転写活性を抑制するとともに、1〜3mg/kgの用量でマウスコラーゲン関節炎の発症を抑制した。これらの化合物がRA治療に臨床応用されるには安全性など解明すべき点はあるが、今後の進展が期待される。この化合物によるHERV周辺メチル化プロフィールの変化は軽微である。Suppression PCRは簡便さあり、今後多くの自己免疫疾患を対象にしたHERV周辺DNAメチル化パターンの検出に有用であると考えられる。
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