肝炎ウイルスの長期複製による肝がん誘発機構に関する研究

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16H05196
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 加藤 宣之 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (40150883)
• 研究分担者: 金 惠淑 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (70314664) ; 佐藤 伸哉 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (80333558) ; 團迫 浩方 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (80379841) ; 上田 優輝 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (90756074)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: C型肝炎ウイルス(HCV) / B型肝炎ウイルス(HBV) / HCV長期複製細胞 / HBV長期複製細胞 / 遺伝子発現変動 / Exosome

研究実績の概要

本研究は、B型肝炎ウイルス(HBV)やC型肝炎ウイルス(HCV)の増殖が長期に及ぶことにより、細胞のがん化を誘導する宿主因子の不可逆的変化が一定の確率で起こるという仮説の立証を目的とした。この目的を達成するために、HCVについては独自に開発したHCVゲノムが自律的に複製増殖する数種類の培養ヒト肝細胞を用いて研究を遂行した。HBVについては、HBVが感染増殖する培養ヒト肝細胞のシステムの構築を行いつつ研究を遂行した。得られた研究成果を以下に示した。
(1) HCVの長期複製により不可逆的に発現低下した遺伝子として同定したCPB2の発現制御候補として絞り込んだ5遺伝子（VCX2, AGR2, ALB, AHSG及びCPB2）について、VCX2とAGR2を培養肝細胞で共発現させた場合にCPB2遺伝子の発現回復が部分的に認められたことから、さらにALB或いはAHSG遺伝子を共発現させ検討したが、更なる発現上昇は認められなかった。(2) ヒト不死化NKNT-3細胞からHBV高感受性として得られたサブクローン化細胞を用いてHBV感染から１ヶ月以上HBVを複製させるシステムを構築した。(3) ヒト肝がんLi23細胞からもHBV高感受性サブクローン化細胞が得られ、HBV感染から3週間以上HBVの複製過程が維持されていることが分かった。(4) (2)と(3)で得られたHBV高感受性細胞を用いた解析から、HBVに対する高感受性化は自然免疫関連因子であるSTINGの発現量が低下することにより引き起こされることを明らかにした。(5) NKNT-3細胞由来のHBV低感受性細胞から産生されるexosome量はHBV高感受性細胞より高いことを明らかにした。さらに、HBV感染により誘導された抗ウイルス活性がexosomeを介して細胞間で伝達されていることを示唆する結果を得た。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] High‐level expression of STING restricts susceptibility to HBV by mediating type III IFN induction. (2019)
  • 著者名/発表者名: Dansako H, Imai H, Ueda Y, Satoh S, Shimotohno K, Kato N.
  • 雑誌名: FASEB BioAdvances 巻: 1 ページ: 67-80
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Acidic polysaccharides isolated from marine algae inhibit the early step of viral infection. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ueno M, Nogawa M, Siddiqui R, Watashi K, Wakita T, Kato N, Ikeda M, Okimura T, Isaka S, Oda T, Ariumi Y.
  • 雑誌名: Int J Biol Macromol 巻: 124 ページ: 282-290
  • DOI: doi: 10.1016/j.ijbiomac
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Ribavirin-induced downregulation of CCAAT/enhancer-binding protein α leads to suppression of lipogenesis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Satoh S, Onomura D, Ueda Y, Dansako H, Honda M, Kaneko S, Kato N.
  • 雑誌名: Biochem J 巻: 476 ページ: 137-149
  • DOI: doi: 10.1042/BCJ20180680
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple antiviral activities of the antimalarial and anti-hepatitis C drug candidates N-89 and N-251 (2018)
  • 著者名/発表者名: Ueda Youki、Gu Weilin、Dansako Hiromichi、Kim Hye-Sook、Yoshizaki Sayaka、Okumura Nobuaki、Ishikawa Tomohiro、Nishitsuji Hironori、Kato Fumihiro、Hishiki Takayuki、Satoh Shinya、Ishii Koji、Masuda Michiaki、Shimotohno Kunitada、Ikeda Masanori、Kato Nobuyuki
  • 雑誌名: Biochemistry and Biophysics Reports 巻: 15 ページ: 1～6
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrep.2018.05.007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Daunorubicin, a topoisomerase II poison, suppresses viral production of hepatitis B virus by inducing cGAS-dependent innate immune response. (2018)
  • 著者名/発表者名: Imai H, Dansako H, Ueda Y, Satoh S, Kato N.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 504 ページ: 672-678
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2018.08.195.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of interferon signaling and HCV-RNA replication by extracellular matrix. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kuwashiro T, Iwane S, Jinghe X, Matsuhashi S, Eguchi Y, Anzai K, Fujimoto K, Mizuta T, Sakamoto N, Ikeda M, Kato N, Ozaki I.
  • 雑誌名: Int J Mol Med 巻: 42 ページ: 957-965
  • DOI: doi: 10.3892/ijmm.2018.3693
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dual effects of the Nrf2 inhibitor for inhibition of hepatitis C virus and hepatic cancer cells. (2018)
  • 著者名/発表者名: Murakami Y, Sugiyama K, Ebinuma H, Nakamoto N, Ojiro K, Chu P-S, Taniki N, Saito Y, Teratani T, Koda Y, Suzuki T, Saito K, Fukasawa M, Ikeda M, Kato N, Kanai T, Saito H.
  • 雑誌名: BMC Cancer 巻: 18 ページ: 680
  • DOI: doi: 10.1186/s12885-018-4588-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 抗マラリア及び抗HCV薬候補N-89とN-251が有する幅広い抗ウイルス活性 (2018)
  • 著者名/発表者名: 上田 優輝, 谷イ琳, 團迫 浩方, 金 惠淑, 吉崎 佐矢香, 奥村 暢章, 石川 知弘, 西辻 裕紀, 加藤 文博, 日紫喜 隆行, 佐藤 伸哉, 石井 孝司, 増田 道明, 下遠野 邦忠, 池田 正徳, 加藤 宣之
  • 学会等名: 第28回抗ウイルス療法学会学術集会
• [学会発表] Suppression of oncolytic adenovirus-mediated hepatotoxicity by liver-specific inhibition of NF-κB (2018)
  • 著者名/発表者名: Mitsuhiro Machitani, Fuminori Sakurai, Keisaku Wakabayashi, Masashi Tachibana, Nobuyuki Kato, Toshiyoshi Fujiwara, Hiroyuki Mizuguchi
  • 学会等名: 第24回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
• [学会発表] B型肝炎ウイルス感染ヒト不死化肝NKNT-3細胞由来のエクソソーム内タンパク質の解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 團迫 浩方、今井 大誉、上田 優輝、佐藤 伸哉、加藤 宣之
  • 学会等名: 第５回日本細胞外小胞学会
• [学会発表] Analysis of the new host factors necessary for susceptibility to HBV using plural human cell lines (2018)
  • 著者名/発表者名: Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 2018 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B Virus
  • 国際学会
• [学会発表] Topoisomerase II inhibitor triggers cyclic GMP-AMP synthase-dependent innate immune response in human immortalized hepatocyte NKNT-3 (2018)
  • 著者名/発表者名: Hirotaka Imai, Hiromichi Dansako, Youki Ueda, Shinya Satoh, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Drug screening for suppression of lipogenesis through downregulation of C/EBPα (2018)
  • 著者名/発表者名: Shinya Satoh, Daichi Onomura, Koichi Watashi, Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Masao Honda,, Shuichi Kaneko, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Mechanism of GPAM suppression by Anti-HCV drug ribavirin (2018)
  • 著者名/発表者名: Daichi Onomura, Shinya Satoh, Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Screening of the new host factors necessary for HBV proliferation using plural human cell lines (2018)
  • 著者名/発表者名: Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Analysis of host and viral factors contributing to resistant acquisition for the preclinical anti-HCV drugs, N-89 and N-251 (2018)
  • 著者名/発表者名: Weilin Gu, Youki Ueda, Shinya Satoh, Hiromichi Dansako, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Highly expression of STING restricts HBV infection by mediating the induction of type III interferon in human immortalized hepatocyte NKNT-3 (2018)
  • 著者名/発表者名: Hiromichi Dansako, Hirotaka Imai, Youki Ueda, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] Perospirone, an antipsychotics, exhibits anti-hepatitis C virus activity (2018)
  • 著者名/発表者名: Midori Takeda, Tomoka Taniguchi, Matsue Maezono, Takaji Wakita, Nobuyuki Kato, Masanori Ikeda
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会
• [学会発表] 抗HCV剤としての抗精神病薬ペロスピロンの可能性について (2018)
  • 著者名/発表者名: 武田 緑、谷口 智香、前園 夏絵、脇田 隆字、加藤 宣之、池田 正徳
  • 学会等名: 第41回日本分子生物学会年会
• [備考] 腫瘍ウイルス学分野Research
  • URL: http://www.okayama-u.ac.jp/user/med/dmb/research.html