研究課題/領域番号 |
16H05449
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研究機関 | 岡山大学 |
研究代表者 |
尾崎 敏文 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (40294459)
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研究分担者 |
森田 卓也 岡山大学, 大学病院, 医員 (10743007)
國定 俊之 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (80346428)
藤原 智洋 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (80639211) [辞退]
杉原 進介 独立行政法人国立病院機構四国がんセンター(臨床研究センター), その他部局等, 医長 (60314671)
清野 正普 岡山大学, 大学病院, 医員 (60756097)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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キーワード | liquid biopsy / exosome / 骨軟部肉腫 |
研究実績の概要 |
近年microRNAやexosomeといった体液中を循環する分子を用いて、腫瘍の状態を監視することができるliquid biopsyという手法が盛んに研究されている。既に大腸がんなどで腫瘍由来exosomeの検出が既存のマーカーよりも有用である可能性が報告されているが、肉腫における知見は報告されていない。本研究では特に血液中に循環するエクソソームの表面に存在するタンパクを用いて骨軟部肉腫患者のモニタリングや治療奏功性を判断することのできるバイオマーカーの開発を目指す。今年度は、昨年度報告したEwing肉腫に特徴的なCD99をエクソソーム表面に存在することに加え、プロテオーム解析からCD99以外の候補蛋白を抽出し、Ewing肉腫細胞株および患者血清由来エクソソームを用いて体液診断への応用の可能性を検討した。 (方法)候補蛋白をwestern blotでcell lysateとエクソソームにおける発現を確認した。次にEwing肉腫担癌マウス血清由来exosomeにおける候補蛋白の発現をEVSECOND法によって分離したエクソソームを用いて、サンドイッチELISAにより確認した。同様の方法で、Ewing肉腫患者血清由来exosomeについても検討した。 (結果)候補蛋白のうちprotein-Aの発現を細胞内とエクソソームで強く認めた。また候補タンパクのprotein-AはEwing肉腫担癌マウスにおいて担癌状態を識別することができ、臨床検体によってもその有用性を確認できた。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
プロテオーム解析から候補タンパクを選択し、サンドイッチELISA法を用いて、Ewing肉腫担癌マウス血清や患者血清において発現を確認できた。
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今後の研究の推進方策 |
今後は症例を増やして臨床検体におけるバイオマーカーとしての有用性を確認していく。またサンドイッチELISA法で検出を行っているが、より簡便なExoscreenによるタンパク検出の開発を目指す。
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