肺癌におけるHippo pathwayのエピゲノム制御への関わり

2017 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K08672
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 松原 大祐 自治医科大学, 医学部, 准教授 (80415554)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 神経内分泌分化 / Hippo pathway / Non-TRU type / TTF-1/NKX2-1 mutations

研究実績の概要

高悪性度神経内分泌腫瘍細胞株１５株の遺伝子発現データのクラスター解析 により、神経内分泌マーカーを高発現する細胞株１１株と、神経内分泌マーカーの発 現の乏しい細胞株4株に分類され、かつ、神経内分泌マーカーを高発現する細胞株は 、いずれもYAP1の発現が欠失していた。非小細胞肺癌細胞株４０株の中でYAP1の欠失 がみられたのは、唯一、神経内分泌マーカーを高発現するVMRC-LCDのみであり、その Xenograft tumorの免疫組織学的、電子顕微鏡的解析により、VMRC-LCDがLCNEC細胞株 であることを見出した。次に、非小細胞肺癌症例189例、小細胞癌症例41例、LCNEC症 例30例について、YAP1の染色を施行したところ、YAP1は非小細胞肺癌では3%(6/189) で陰性であるのに対し、LCNECでは60％(18/30)で陰性、小細胞癌では98％(40/41)で 陰性であった。予後解析の結果から、高悪性度神経内分泌腫瘍の中でYAP1陰性症例は 、YAP1陽性症例より化学療法に感受性を示すことが示され、YAP1陽性、陰性の小細胞 癌細胞株による薬剤感受性試験でも同様の結果が得られた。YAP1陽性の細胞株3株でY AP1遺伝子を抑制することで、神経内分泌マーカーRAB3Aの発現上昇が認められた。以 上の結果より、YAP1は肺癌の神経内分泌分化の制御に関わることが示された。さらに、Non-TRU type肺腺癌のFrozen sectionを次世代シークエンサーによって解析し、Gastrointestinal differentiationを示す群がみられ、かつ、TTF-1の不活性型変異が高頻度であることを示した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

肺癌細胞株、肺癌切除検体を用いた解析を行い、癌におけるYAPその他のHippo pathway分子の異常と、BRG1, BRM, LSD1等のエピゲノムの異常、そして分化形質、神経内分泌分化との関係性を追及しており、その結果をまとめて、国際肺癌学会(2017)や米国癌学会(2018)などの国際学会、および、国際雑誌(Cancer Science 2016, Cancer Science 2017)において、Corresponding author, First authorとして研究内容を発表した。

今後の研究の推進方策

肺腺癌におけるHippo pathwayに関わる接着分子の解明、さらに、Non-TRU type肺腺癌における治療ターゲットについて、検索する。

次年度使用額が生じた理由

平成29年度に、数種類の細胞株で、ヒストンメチルトランスフェラーゼであるPRMT5のShRNAを行っているが、なかなかうまく行かず、このままうまくいかない場合には、Wetstern blotの実験を次年度に持ち越しとなり、かつ、次年度にトランスフェクション効率の良い細胞株をあらたに購入する可能性が出てきたため。

研究成果

• [雑誌論文] Expression of protein arginine methyltransferase-5 in oral squamous cell carcinoma and its significance in epithelial-to-mesenchymal transition. (2018)
  • 著者名/発表者名: Amano Y, Matsubara D, Yoshimoto T, Tamura T, Nishino H, Mori Y, Niki T
  • 雑誌名: Pathol int 巻: Mar 30 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1111/pin.12666.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Synchronous gastric leiomyoma and intramuscular abdominal wall granular cell tumor with similar imaging features: A case report. (2018)
  • 著者名/発表者名: Saito S, Yan C, Fukuda H, Hosoya Y, Matsumoto S, Matsubara D, Kitayama J,Lefor AK, Sata N.
  • 雑誌名: Int J Surg Case Rep 巻: 44 ページ: 207-211
  • DOI: 10.1016/j.ijscr.2018.03.001.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Establishment and analysis of a novel mouse line carrying a conditional knockin allele of a cancer-specific FBXW7 mutation. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ikenoue T, Terakado Y, Zhu C, Liu X, Ohsugi T, Matsubara D, Fujii T, Kakuta S,Kubo S, Shibata T, Yamaguchi K, Iwakura Y, Furukawa Y.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 8 ページ: 2021
  • DOI: 10.1038/s41598-018-19769-1.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] An isolated metachronous metastasis to the adrenal gland from a pancreatic neuroendocrine tumor: A case report. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sakuma Y, Sata N, Endo K, Yasuda Y, Yokota S, Hosoya Y, Shimizu A, Fujii H,Matsubara D, Fukushima N, Asakawa S, Shimada YK, Lefor CK, Lefor AK.
  • 雑誌名: Int J Surg Case Rep 巻: 41 ページ: 169-173
  • DOI: 10.1016/j.ijscr.2017.10.017.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Establishment of highly metastatic KRAS mutant lung cancer cell sublines in long-term three-dimensional low attachment cultures. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakano T, Kanai Y, Amano Y, Yoshimoto T, Matsubara D, Shibano T, Tamura T, Oguni S, Katashiba S, Ito T, Murakami Y, Fukayama M, Murakami T, Endo S, Niki T.
  • 雑誌名: Plos One 巻: 12 ページ: e0181342
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0181342.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Inactivating mutations and hypermethylation of the NKX2-1/TTF-1 gene in non-terminal respiratory unit-type lung adenocarcinomas. (2017)
  • 著者名/発表者名: Matsubara D, Soda M, Yoshimoto T, Amano Y, Sakuma Y, Yamato A, Ueno T, Kojima S, Shibano T, Hosono Y, Kawazu M, Yamashita Y, Endo S, Hagiwara K, Fukayama M,Takahashi T, Mano H, Niki T.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 108 ページ: 1888-1896
  • DOI: 10.1111/cas.13313.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] A case of primary aldosteronism caused by unilateral multiple adrenocortical micronodules presenting as muscle cramps at rest: The importance of functional histopathology for identifying a culprit lesion. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ito A, Yamazaki Y, Sasano H, Matsubara D, Fukushima N, Tamba M, Tabata K, Ashizawa K, Takei A, Koizumi M, Sakuma Y, Sata N, Oshiro H.
  • 雑誌名: Pathol Int 巻: 67 ページ: 214-221
  • DOI: 10.1111/pin.12521.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Identification of cell-type-specific mutations in nodal T-cell lymphomas. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nguyen TB, Sakata-Yanagimoto M, Asabe Y, Matsubara D, Kano J, Yoshida K, Shiraishi Y, Chiba K, Tanaka H, Miyano S, Izutsu K, Nakamura N, Takeuchi K, Miyoshi H, Ohshima K, Minowa T, Ogawa S, Noguchi M, Chiba S.
  • 雑誌名: Blood Cancer J 巻: 7 ページ: e516
  • DOI: 10.1038/bcj.2016.122.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Pancreatic neuroendocrine tumor with metastasis to the spleen: a case report. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sakuma Y, Yasuda Y, Sata N, Hosoya Y, Shimizu A, Fujii H, Matsubara D, Fukushima N, Miki A, Maeno M, Lefor AK.
  • 雑誌名: BMC Cancer 巻: 17 ページ: 37
  • DOI: 10.1186/s12885-016-3020-8.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Crohn's disease presenting as a ceco-urachal fistula. (2017)
  • 著者名/発表者名: Tsukui H, Koinuma K, Morimoto M, Horie H, Lefor AK, Kagaya Y, Takahashi H, Yano T, Matsubara D, Yamamoto H, Sata N.
  • 雑誌名: Clin J Gastroenterol 巻: 10 ページ: 32-36
  • DOI: 10.1007/s12328-016-0691-2.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Addiction to the IGF2-ID1-IGF2 circuit for maintenance of the breast cancer stem-like cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Tominaga K, Shimamura T, Kimura N, Murayama T, Matsubara D, Kanauchi H, Niida A, Shimizu S, Nishioka K, Tsuji EI, Yano M, Sugano S, Shimono Y, Ishii H, Saya H, Mori M, Akashi K, Tada KI, Ogawa T, Tojo A, Miyano S, Gotoh N.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 36 ページ: 1276-1286
  • DOI: 10.1038/onc.2016.293.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] 胸部の原発不明がんの鑑別 (2017)
  • 著者名/発表者名: 松原大祐
  • 雑誌名: 病理と臨床 巻: 35 ページ: 152-159
• [学会発表] Reciprocal expressions of TFF-1 and TTF-1 in lung adenocarcinomas (2018)
  • 著者名/発表者名: Matsubara D
  • 学会等名: .AACR Annual Meeting 2018 in Chicago
• [学会発表] Knockdown of BRM Causes Epithelial-Mesenchymal Transition in Lung Adenocarcinoma Cell Line H1975 (2017)
  • 著者名/発表者名: Matsubara D
  • 学会等名: IASLC 18th World Conference on Lung Cancer in Yokohama
• [備考] 自治医大統合病理学部門
  • URL: http://www.jichi.ac.jp/pathol/