研究課題/領域番号 |
16K10817
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研究機関 | 福井大学 |
研究代表者 |
中嶋 秀明 福井大学, 学術研究院医学系部門, 講師 (10397276)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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キーワード | 脊髄障害性疼痛 / 脊髄損傷 / 圧迫性脊髄症 / ニューロイメージング / PET |
研究実績の概要 |
C57BL/6マウスにC57BL/6-Tg (CAG-EGFP:グリーンマウス)より採取した骨髄細胞を移植しキメラマウスを作成した。IH impactorを用いて60Kdynの胸髄圧挫損傷を加えた。1次抗体にIba-1、CD11b、PBRを用いた免疫組織化学的評価を経時的行った。定量的評価としてflow cytometryを用いたmicroglia分画の同定を行い、PBRの細胞局在と経時的変化を定量化した。次に、1nMに調節した3H-(R)PK11195を反応させ、micro-autoradiographyの手法で損傷脊髄におけるPK11195の集積を経時的に評価した。また、SDラットの頸椎椎弓を部分的に切除し第4頸髄にIH impactorを用いて脊髄損傷モデルを作成し、損傷後3日目にCT,MRIを撮影し、 [11C]-PK11195をinjectionしdynamic PET撮影を90分間行ないSUVを算出した。 免疫染色でPBRは主にIba-1と一致し、flow cytometryでもPBRは主にmicrogliaの分画に存在していた。microgliaは損傷後7日まで上昇がみられ、それ以降は漸減していった。micro-autoradiographyにおいてもPK11195は主に脊髄灰白質に分布しており、損傷後7日で集積のピークを認め4-6週の慢性期においてもその発現が確認できた。PETにおいてもPK11195は対象と比較して脊髄損傷部位に集積する傾向にあった。腰膨大部においても集積傾向を認めた。 PK11195を用いたautoradiographyの結果は、従来の細胞マーカーとほぼ一致しており、脊髄損傷におけるactivated microgliaの動態を反映する可能性が示唆された。脊髄損傷後のmicrogliaの動態をイメージングにより可視化できる可能性が示唆された。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
in vitro studyはやや遅れているが、in vivo studyは次年度以降計画分まで進行している。
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今後の研究の推進方策 |
ain vivo study, in vitro studyを継続し、最終的にはヒトへの臨床応用の結果を報告する予定である。
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次年度使用額が生じた理由 |
補助事業の誠実な執行に努めた結果、当初計画より経費の使用が節約できたことにより未使用額が生じた。
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次年度使用額の使用計画 |
当該未使用額を次年度に持ち越して追加の試薬・抗体・消耗品等購入する。
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