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2017 年度 研究成果報告書

P糖タンパク質立体構造のNMR解析を可能にする実験法の開発

研究課題

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研究課題/領域番号 16K15105
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 物理系薬学
研究機関京都大学

研究代表者

加藤 博章  京都大学, 薬学研究科, 教授 (90204487)

連携研究者 宮ノ入 洋平  大阪大学, 蛋白質研究所, 准教授 (80547521)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2018-03-31
キーワード膜タンパク質 / NMR / 多剤耐性 / ATP / トランスポーター / 構造生物学 / 薬理学 / 好熱性真核生物
研究成果の概要

真核生物由来の巨大な膜タンパク質であるP糖タンパク質のNMRによる解析の実現を目指して、安定同位体標識に適した大量発現系の構築と限定的な同位体標識法を検討した。その結果、メタノール資化性酵母Pichia pastorisを用いることにより、15N標識を行って、数十ミリグラムレベルの標識試料タンパク質を精製することができた。また、そのタンパク質を用いてNMR測定を行うことにより、動的構造の解析に適すると考えられるスペクトルを得ることができた。

自由記述の分野

構造生物学

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公開日: 2019-03-29  

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