膵がん背景疾患としてのNASP病態解明のための基礎的検討

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K15428
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 鎌田 佳宏 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (30622609)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: NASP / NASH / Mac-2bp

研究実績の概要

（１）マウスNASHモデルを用いたNASP病態の解明
平成28年度は動物実験では数種類のNASH誘発モデルを用いて野生型マウスを対象にその際に起こる膵臓の変化を検討し、膵臓に強い変化を有するNASHモデルを同定した。あるNASHモデルでは投与週数が増えるに従い膵臓組織像に変化が生じ、投与10週では膵実質に著明な炎症細胞浸潤を認め、脂肪沈着を起こした膵腺房細胞が増加することを認めた。この組織像の変化はまさにNASPの組織像であった。現在、NASH病態進展に伴う、膵組織の変化についての検討を引き続き行っており、その他の慢性肝疾患モデルについても現在検討中である。これまでにヒトNASHにおいて血中Mac-2 binding protein (Mac-2bp)が上昇し、バイオマーカーとなることを報告してきたが平成28年度はヒト慢性膵炎患者においてもMac-2bpがバイオマーカーとなることを見出し、論文報告した。NASHとNASP共通の病態バイオマーカーとしてMac-2bpが候補となりうると考えている。マウスMac-2bp ELISAの樹立もおこなった。このELISAは精度が高く、黄疸、溶血、高脂血症下での測定も可能であった。このELISAは2016年11月に市販された。このELISAを用いて種々のNASHモデルで血中濃度が上昇することを確認し、論文報告した。
（２）細胞実験によるNASP病態の解明
ヒトNASH進展促進には一般的に飽和脂肪酸、コレステロールが、進展抑制には不飽和脂肪酸が重要な脂質と考えられている。現在、種々の脂質を膵臓由来細胞株に投与し、主に細胞増殖、細胞死、糖鎖修飾についての検討を行っている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

NASH病態進展に伴い発症するNASPマウスモデルを見出し、共通の病態バイオマーカーとしてMac-2bpを見出した。

今後の研究の推進方策

（１）マウスNASHモデルを用いたNASP病態の解明
平成29年度も引き続きマウスを用いた動物実験モデルでの検討を継続していく。見出したNASP誘発NASHモデルを用いてレクチンアレイ解析を中心としたグライコプロテオミクスの手法を用いた解析を行い、NASHマウスの肝臓と膵臓に共通の糖鎖修飾の変化を見いだしていく。共通の糖鎖修飾の変化が見られればヒト臨床検体を用いて膵がん症例の背景膵臓に同様の糖鎖修飾変化が起こっているかについてレクチン染色を用いて検討していく。また糖鎖修飾を変化させることが治療標的になりうるかについての検討を行うため糖鎖遺伝子改変マウス、糖鎖修飾阻害剤を用いた検討を行い、治療応用が可能かについても検討していく。
（２）細胞実験によるNASP病態の解明
平成29年も引き続き細胞実験も継続していく。脂質による細胞増殖、細胞死、糖鎖修飾の変化についての検討結果を基に細胞実験でも糖鎖修飾の変化が治療に応用できるかについての検討を行っていく。具体的には糖鎖修飾遺伝子改変細胞を作成し、各脂質添加による細胞増殖、細胞死についての変化を検討していく。

次年度使用額が生じた理由

マウス、細胞実験の解析が予想より時間がかかり、遺伝子発現、蛋白発現の解析、組織学的検討について次年度に組み込んだため。

次年度使用額の使用計画

マウス、細胞実験を継続し、平成29年度に遺伝子発現、蛋白発現、組織学的検討について順次行っていく。

研究成果

• [雑誌論文] Hepatic aberrant glycosylation by N-acetylglucosaminyltransferase V accelerates HDL assembly. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kamada Y, Kida S, Hirano KI, Yamaguchi S, Suzuki A, Hashimoto C, Kimura A, Sato M, Fujii H, Sobajima T, Yamamoto A, Ebisutani Y, Takamatsu S, Shinzaki S, Yoshida Y, Yamada M, Nagasaka H, Takehara T, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 巻: 311 ページ: G859-G868
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00231.2016.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Application of glyco-science to the early detection of pancreatic cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Miyoshi E, Kamada Y.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 107 ページ: 1357-1362
  • DOI: 10.1111/cas.13011.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Core-fucosylation plays a pivotal role in hepatitis B pseudo virus infection: a possible implication for HBV glyco-therapy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takamatsu S, Shimomura M, Kamada Y, Maeda H, Sobajima T, Hikita H, Iijima M, Okamoto Y, Misaki R, Fujiyama K, Nagamori S, Kanai Y, Takehara T, Ueda K, Kuroda S, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 26 ページ: 1180-1189
  • DOI: 10.1093/glycob/cww067.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum Mac-2 binding protein is a novel biomarker for chronic pancreatitis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Maekawa T, Kamada Y, Ebisutani Y, Ueda M, Hata T, Kawamoto K, Takamatsu S, Mizutani K, Shimomura M, Sobajima T, Fujii H, Nakayama K, Nishino K, Yamada M, Kumada T, Ito T, Eguchi H, Nagano H, Miyoshi E.
  • 雑誌名: World J Gastroenterol 巻: 22 ページ: 4403-10
  • DOI: 10.3748/wjg.v22.i17.4403.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Core Fucosylation on T cells, Required for Activation of T-cell Receptor Signaling and Induction of Colitis in Mice, is Increased in Patients with Inflammatory Bowel Disease. (2016)
  • 著者名/発表者名: Fujii H, Shinzaki S, Iijima H, Wakamatsu K, Iwamoto C, Sobajima T, Kuwahara R, Hiyama S, Hayashi Y, Takamatsu S, Uozumi N, Kamada Y, Tsujii M, Taniguchi N, Takehara T, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 150 ページ: 1620-32
  • DOI: 10.1053/j.gastro.2016.03.002.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A glycoproteomic approach to identify novel glycomarkers for cancer stem cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sawanobori A, Moriwaki K, Takamatsu S, Kamada Y, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Proteomics 巻: 16 ページ: 3073-3080
  • DOI: 10.1002/pmic.201500472.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of plasma transaminase levels on the peripheral blood glutamate levels and memory functions in healthy subjects. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kamada Y, Hashimoto R, Yamamori H, Yasuda Y, Takehara T, Fujita Y, Hashimoto K, Miyoshi E.
  • 雑誌名: BBA Clin 巻: 5 ページ: 101-7
  • DOI: 10.1016/j.bbacli.2016.02.004.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Site-specific and linkage analyses of fucosylated N-glycans on haptoglobin in sera of patients with various types of cancer: possible implication for the differential diagnosis of cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takahashi S, Sugiyama T, Shimomura M, Kamada Y, Fujita K, Nonomura N, Miyoshi E, Nakano M.
  • 雑誌名: Glycoconj J 巻: 33 ページ: 471-82
  • DOI: 10.1007/s10719-016-9653-7.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific increase in serum core-fucosylated haptoglobin in patients with chronic pancreatitis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Kamada Y, Takamatsu S, Shimomura M, Maekawa T, Sobajima T, Fujii H, Nakayama K, Nishino K, Yamada M, Kobayashi Y, Kumada T, Ito T, Eguchi H, Nagano H, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Pancreatology 巻: 16 ページ: 238-43
  • DOI: 10.1016/j.pan.2016.01.004.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gab1 adaptor protein acts as a gatekeeper to balance hepatocyte death and proliferation during acetaminophen-induced liver injury in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Furuta K, Yoshida Y, Ogura S, Kurahashi T, Kizu T, Maeda S, Egawa M, Chatani N, Nishida K, Nakaoka Y, Kiso S, Kamada Y, Takehara T.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 63 ページ: 1340-55
  • DOI: 10.1002/hep.28410.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elevation of CA19-9 related novel marker, Core 1 Sialyl Lewis A, in sera of adenocarcinoma patients verified by a SRM based method. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka-Okamoto M, Yabu M, Mukai M, Takahashi H, Fujiwara Y, Ohue M, Kamada Y, Miyoshi E, and Miyamoto Y.
  • 雑誌名: J Proteome Res 巻: 15 ページ: 152-65
  • DOI: 10.1021/acs.jproteome.5b00893.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatocellular carcinoma in Japanese patients with nonalcoholic fatty liver disease and alcoholic liver disease: multicenter survey. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tokushige K, Hyogo H, Nakajima T, Ono M, Kawaguchi T, Honda K, Eguchi Y, Nozaki Y, Kawanaka M, Tanaka S, Imajo K, Sumida Y, Kamada Y, et al.
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 51 ページ: 586-96
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1129-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of aberrant IgG glycosylation in the pathogenesis of inflammatory bowel disease. (2016)
  • 著者名/発表者名: Miyoshi E, Shinzaki S, Fujii H, Iijima H, Kamada Y, Takehara T.
  • 雑誌名: Proteomics Clin Appl 巻: 10 ページ: 384-90
  • DOI: 10.1002/prca.201500089.
  • 査読あり
• [雑誌論文] N-Acetylglucosaminyltransferase V exacerbates murine colitis with macrophage dysfunction and enhances colitic tumorigenesis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shinzaki S, Ishii M, Fujii H, Iijima H, Wakamatsu K, Kawai S, Shiraishi E, Hiyama S, Inoue T, Hayashi Y, Kuwahara R, Takamatsu S, Kamada Y, Morii E, Tsujii M, Takehara T, Miyoshi E.
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 51 ページ: 357-69
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1119-3.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ectopic expression of N-acetylglucosaminyl transferase V (GnT-V) accelerates hepatic triglyceride synthesis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ebisutani Y, Kamada Y, Kida S, Mizutani K, Akita M, Yamamoto A, Fujii H, Sobajima T, Terao N, Takamatsu S, Yoshida Y, Takehara T, Miyoshi E.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 46 ページ: E118-29
  • DOI: 10.1111/hepr.12541.
  • 査読あり
• [学会発表] コアフコースを標的とした糖鎖治療法開発の基礎的検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: 第41回日本肝臓学会東部会
  • 発表場所: 京王プラザホテル 東京
  • 年月日: 2016-12-08 – 2016-12-09
• [学会発表] Impact of plasma transaminase levels on the peripheral blood glutamate levels and memory functions in healthy subjects (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshihiro Kamada, Ryota Hashimoto, Hidenaga Yamamori, Yuka Yasuda, Tetsuo Takehara, Yuko Fujita, Kenji Hashimoto, Eiji Miyoshi
  • 学会等名: The 67 th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston, U.S.A.
  • 年月日: 2016-11-11 – 2016-11-15
  • 国際学会
• [学会発表] Roles of Mac-2 binding protein in the NASH liver fibrosis progression (2016)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Ebisutani, Yoshihiro Kamada, Akiko Yamamoto, Shun Ikeda, Hitomi Arai, Ayumi Iwata, Eiji Miyoshi. et al.
  • 学会等名: The 67 th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston, U.S.A.
  • 年月日: 2016-11-11 – 2016-11-15
  • 国際学会
• [学会発表] Mac-2 binding proteinのNASHバイオマーカーとしての意義 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: JDDW 2016
  • 発表場所: 神戸国際会議場 神戸
  • 年月日: 2016-11-03 – 2016-11-06
• [学会発表] 膵がん、慢性膵炎に対する新規糖鎖バイオマーカーの開発 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: JDDW 2016
  • 発表場所: 神戸国際会議場 神戸
  • 年月日: 2016-11-03 – 2016-11-06
• [学会発表] コアフコシル化を標的とした新規NASH治療法の開発の基礎的検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: JDDW 2016
  • 発表場所: 神戸国際会議場 神戸
  • 年月日: 2016-11-03 – 2016-11-06
• [学会発表] 炎症性腸疾患の新しい病態解明から臨床糖鎖免疫学の創成 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、三善英知
  • 学会等名: 第35回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 高知市文化プラザかるぽーと 高知
  • 年月日: 2016-09-01 – 2016-09-03
• [学会発表] 血液糖鎖バイオマーカーを使ったBallooning hepatocyteの診断予測 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: 第52回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ幕張 千葉
  • 年月日: 2016-05-19 – 2016-05-20
• [学会発表] レクチンを用いた新規NASH治療法開発への基礎的検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鎌田佳宏、竹原徹郎、三善英知
  • 学会等名: 第102回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル 東京
  • 年月日: 2016-04-21 – 2016-04-23