| 研究実績の概要 |
AMH-TRECKマウスの胎子精巣をDT存在下で24時間培養した後、DT非存在下で培養を継続した場合、セルトリ細胞の消失に伴い卵巣化遺伝子Foxl2, Hmgcs2, Wnt4, Irx3, Esr1の発現上昇が誘導された。そこで、最終年度においては、さらにin situ hybridizationによるマーカー発現解析の結果、発生後期から生後卵巣の卵巣皮質索において特異的な発現が知られているLgr5, Gng13の皮質側における局所的な発現が確認された。そのため、セルトリ細胞除去による卵巣索の形成は、通常の生後1－4日目で生じる性周期卵胞の誘導と共通のコア・カスケードにより起動されていることが判明した。
また、セルトリ細胞からの二次性索（卵巣皮質）誘導のパラクライン因子の同定するため、AMH-TRECK 胎子精巣をDT存在下で24時間培養した後、FGF9、AMH、テストステロン等の候補因子を添加した結果、FGF9の添加によりFoxl2の発現が抑制された。テストステロンも同様にFoxl2発現に抑制的に作用することが判明した。
以上のことから精巣上皮からの卵巣索（性周期卵胞系譜）のtissue-autonomousな誘導は、セルトリ細胞からのFGFシグナルとテストステロンにより抑制されていることが判明した。
なお、胎齢13.5日卵巣から単離したシングルセル（中腎遠位側で184個、近位側で234個）の遺伝子発現プロファイルから、体細胞は2つの大きな集団（Soma 1, 2） に区別できることが判明し、二分された体細胞集団では、H19, Fst, Cdkn1cといった増殖制御に関与する因子の発現差に特徴すけられた。そこで、最終年度においては、in situ hybiridization解析により、候補遺伝子の中で、髄質に局在する体細胞に発現するTgfb関連の遺伝子も同定した。
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