絶対定量的質量分析法を用いたアミロイド前駆蛋白質の同定

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K08717
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 堂本 裕加子 (新谷裕加子) 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30596961)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: アミロイドーシス / アミロイド前駆蛋白質 / 質量分析法 / 絶対定量

研究実績の概要

アミロイドーシスには原因となる約30種類の前駆蛋白質が報告されており、免疫組織化学的にアミロイド前駆蛋白質を同定することが一般的であるが、偽陰性や偽陽性により診断確定が困難なことがしばしば経験される。一部の施設では液体クロマトグラフィー質量分析法（LC-MS）も用いられるが、複数のアミロイド前駆蛋白質が検出され、判断に苦慮する場合もある。そこで、我々は12種類のアミロイド前駆蛋白質に由来する特異的なペプチド配列98種を選び、無細胞蛋白質合成系（PURE system）を用いてペプチド鎖を合成、同位体標識を用いたLC-MSを行って、アミロイド前駆蛋白質の絶対定量を行った。
結果、アミロイド前駆蛋白質11種類、53種のペプチド鎖の定量に成功し、免疫組織化学的結果との相関がみられた。血清アミロイドA蛋白（SAA）、トランスサイレチン（TTR）、β2ミクログロブリン（b2MG）を原因とするアミロイドーシス症例（AA、ATTR、Ab2M）では各々病型となるアミロイド前駆蛋白質が多く検出され、本手法によるアミロイド前駆蛋白質の同定が容易であった。免疫グロブリン軽鎖（kappa、lambda）に関しては、AL症例において原因となる軽鎖の検出量が十分ではなかったが、病型診断が可能であった。
また、病型に当たるアミロイド前駆蛋白質以外にも、共沈着していると考えられるアポリポ蛋白質が検出され、病型にあたるアミロイド前駆蛋白質の沈着量と正の相関を示していた。

研究成果

• [雑誌論文] Use of a Non-invasive Cardiac Output Measurement in a Patient with Low-output Dilated Cardiomyopathy. (2020)
  • 著者名/発表者名: Nakayama A, Iwama K, Makise N, Domoto Y, Ishida J, Morita H, Komuro I.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 3 ページ: 1～6
  • DOI: doi: 10.2169/internalmedicine.4271-19
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical and Pathological Characteristics of IgG4-Related Periaortitis/Periarteritis and Retroperitoneal Fibrosis Diagnosed Based on Experts’ Diagnosis (2019)
  • 著者名/発表者名: Mizushima Ichiro、Kasashima Satomi、Fujinaga Yasunari、Notohara Kenji、Saeki Takako、Zen Yoh、Inoue Dai、Yamamoto Motohisa、Kasashima Fuminari、Matsumoto Yasushi、Amiya Eisuke、Sato Yasuharu、Yamada Kazunori、Domoto Yukako、Kawa Shigeyuki、Kawano Mitsuhiro、Ishizaka Nobukazu
  • 雑誌名: Annals of Vascular Diseases 巻: 12 ページ: 460～472
  • DOI: 10.3400/avd.oa.19-00085
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Quantification of DNA Damage in Heart?Tissue as a Novel Prediction Tool for Therapeutic Prognosis of Patients With Dilated Cardiomyopathy (2019)
  • 著者名/発表者名: Ko Toshiyuki、Fujita Kanna、Nomura Seitaro、Uemura Yukari、Yamada Shintaro、Tobita Takashige、Katoh Manami、Satoh Masahiro、Ito Masamichi、Domoto Yukako、Hosoya Yumiko、Amiya Eisuke、Hatano Masaru、Morita Hiroyuki、Fukayama Masashi、Aburatani Hiroyuki、Komuro Issei
  • 雑誌名: JACC: Basic to Translational Science 巻: 4 ページ: 670～680
  • DOI: 10.1016/j.jacbts.2019.05.010
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Enormous Aneurysm in Coronary Artery Fistula With Immunoglobulin G4?Related Disease (2019)
  • 著者名/発表者名: Kadowaki Hiroshi、Amiya Eisuke、Hoshino Yasuhiro、Tamura Maasa、Uehara Masae、Nakayama Atsuko、Nawata Kan、Domoto Yukako、Saeki Takako、Ono Minoru、Komuro Issei
  • 雑誌名: Canadian Journal of Cardiology 巻: 35 ページ: 230.e1～230.e3
  • DOI: 10.1016/j.cjca.2018.11.030
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Renal Effects after Pembrolizumab Treatment for Non-small Cell Lung Carcinoma: A Case Report. (2019)
  • 著者名/発表者名: Oki R, Hirakawa Y, Kimura H, Honda K, Hinata M, Abe H, Domoto Y, Tanaka G, Nagase T, Nangaku M.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 59 ページ: 977～981
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.3928-19.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 絶対定量的質量分析法を用いたアミロイドーシス30症例の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 堂本裕加子、 小川真喜子、 永島良樹、 大出晃士、 清水義宏、 上田泰己、 深山正久
  • 学会等名: 第108回 日本病理学会総会