研究課題/領域番号 |
17K08840
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研究機関 | 順天堂大学 |
研究代表者 |
長岡 功 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60164399)
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研究分担者 |
桑原 京子 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10167976)
射場 敏明 順天堂大学, 医学部, 教授 (40193635)
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研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | ectosome / alarmin / 敗血症 / 好中球 / microparticle / 抗菌ペプチド / cathelicidin / LL-37 |
研究実績の概要 |
近年、敗血症において、好中球からエクトソームectosome と呼ばれるmicroparticle が放出されることが見出されたが、ectosome は病原細菌を殺すだけでなく、宿主細胞機能を変化させることから、敗血症での役割が注目されている。興味深いことに、ectosome には宿主細胞機能を制御する、内因性の危険信号分子アラーミンalarmin が含まれるので、ectosome がalarmin の作用を介して宿主細胞機能を変化させ、敗血症の病態に関わることが予想される。そこで、本研究では、好中球のectosome 形成とalarmin の宿主細胞に対する作用に焦点を当てて、敗血症の病態を解明する。 今年度、敗血症モデルとしてマウスの盲腸結紮穿孔モデルを用いて、ectosome形成を解析したところ、本モデルの腹腔浸出液と血漿において、Ly6G(好中球の表面マーカー)とannexin V(細胞表面ホスファチジルセリン)に陽性のectosomeがmicroparticle中に増加することがわかった。さらに、microparticleをウエスタンブロット法で解析したところ、microparticle中に、好中球の顆粒タンパク質であるミエロペルオキシダーゼ、ラクトフェリンに加えて、alamin分子の一つであるマウスcathelicidin-related antimicrobial peptide(CRAMP)が含まれることがわかった。また、microparticleが抗菌作用を有することを確認した。 これらの結果から、microparticleに含まれるalarmin(CRAMP等)が抗菌作用を介して敗血症の病態に関わる可能性が示唆された。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度は、マウスの敗血症モデルを用いてin vivoでの検討を行い、解析結果を示すことができた。しかし、分離した好中球を用いたin vitroでのectosome形成、ヒト敗血症におけるin vivoでのectosome形成については、次年度以降の課題となった。
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今後の研究の推進方策 |
我々は、ヒトのcathelicidinファミリーの抗菌ペプチドであるLL-37がマウス敗血症モデルの病態を改善し、生存率を高めることを明らかにしている( Int Immunol 28: 245-253, 2016)。そこで、LL-37がマウス敗血症モデルにおいて、ectosome形成に対してどのような影響をおよぼすかについて検討し、alarminであるLL-37の敗血症の病態における役割をectosomeを基軸にして解析する。
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次年度使用額が生じた理由 |
研究の進捗のために、計画よりも、試薬、動物等を多く使用したため。
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