| 研究課題/領域番号 |
17K15716
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
遠田 悦子 東京大学, 大学院医学系研究科(医学部), 特任助教 (00589327)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | ケモカイン受容体 / FROUNT / マクロファージ / 適応免疫応答 / ケモカイン |
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| 研究実績の概要 |
ケモカイン受容体細胞内会合分子FROUNT（フロント）はマクロファージの遊走・集積の制御を介して炎症性疾患の病態に重要な役割を果たすことを明らかにしてきた。本研究では、これまで不明であった、マクロファージによる適応免疫応答制御におけるFROUNTの役割の解明を目的とする。本年度は、FROUNT欠損によるマクロファージの刺激応答性の変化を解析するために、FROUNT欠損マクロファージの調製方法を検討した。タモキシフェン誘導型コンディショナル欠損マウスより骨髄細胞を調製してM-CSF存在下で培養し、骨髄由来マクロファージを分化誘導した。培養開始時よりヒドロキシタモキシフェンを添加することによりFROUNT欠損を誘導した。また個体レベルでマクロファージにおけるFROUNT欠損の影響を調べるために用いる予定のミエロイド系細胞特異的Creマウスからも同様に骨髄由来マクロファージを調製した。FROUNT mRNAの発現量を定量PCRにより定量したところ、いずれもフロント欠損が誘導されていることを確認した。またこれらのマクロファージの各種刺激に対する応答性におけるFROUNT欠損の影響を明らかにするために、マクロファージの分極化刺激として、IL-4あるいはLPS存在下で培養し、M1型、M2型マクロファージに特徴的なマーカーの発現量を定量PCRにより定量したところ、今回測定したマーカーについては、in vitroにおける分極化刺激に対する応答におけるFROUNT欠損による影響は認められなかった。以上より、マクロファージによる適応免疫応答制御におけるFROUNTの役割を解析するためのFROUNT欠損マクロファージの誘導条件が整った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マクロファージ分化誘導とFROUNT欠損誘導の検討、および次年度に予定していたマクロファージ活性化刺激に対する応答の解析まで順調に進んだ。T細胞応答の解析系の準備については次年度に取り組む。
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| 今後の研究の推進方策 |
29年度に完了したin vitroにおけるフロント欠損マクロファージの誘導系を用いて、T細胞との共培養系をセットアップし、T細胞応答制御におけるマクロファージ機能へのフロントの役割を明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
欠損マクロファージ調製方法の検討が順調に進展したため未使用額が生じた。未使用額は30年度のT細胞応答の解析の拡充に充てる。
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