昆虫培養細胞高度利用技術開発のための遺伝子発現ネットワーク解析

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18380044
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用昆虫学
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 小林 淳 山口大学, 農学部, 教授 (70242930)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2009
• キーワード: 昆虫細胞 / 遺伝子発現ネットワーク / カイコ / ゲノム / マイクロアレイ

研究概要

昆虫培養細胞の高度利用技術開発の基盤となる遺伝子発現ネットワークの解明を目的として,カイコ培養細胞を材料に供試して,オリゴDNAマイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を実施し,培養条件の違いにより発現量が異なる遺伝子群の検出に成功した。また,安定な形質転換細胞の構築に必要なpiggyBacベクター系の確立,ならびに,安全な新規農薬開発や昆虫ウイルス感染メカニズム解明に有効な一過性発現ベクターを利用したin vitroアッセイ系の構築に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Bombyx mori Ras proteins, BmRas1, BmRas2 and BmRas3 are neither farnesylated nor palmitoylated but are geranylgeranylated (2009)
  • 著者名/発表者名: Moriya, K., Tsubota, T., Ishibashi, N., Yafune, A., Suzuki, T., Kobayashi, J., Shiotsuki, T., Utsumi, T.
  • 雑誌名: Insect Molecular Biology (published online)
  • 査読あり
• [雑誌論文] cDNA cloning of aquaporin gene expressed in the digestive tract of the Formosan subterranean termite, Coptotermes formosanus Shiraki (Isoptera; Rhinotermitidae) (2009)
  • 著者名/発表者名: Kambara, K., Takematsu, Y., Azuma, T., Kobayashi, J.
  • 雑誌名: Applied Entomology and Zoology 44 ページ: 3-770
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a novel preparation method of recombinant proteoliposomes using baculovirus gene expression systems (2008)
  • 著者名/発表者名: Fukushima, H., Mizutani, M., Imamura, K., Morino, K., Kobayashi, J., Okumura, K., Tsumoto, K., Yoshimura, T.
  • 雑誌名: Journal of Biochemistry 144 ページ: 763-770
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pyridalyl inhibits cellular protein syntesis in insect, but not mammlian, cell lines (2008)
  • 著者名/発表者名: Moriya, K., Hirakura, S., Kobayashi, J., Ozoe, Y., Saito, S., Utsumi, T.
  • 雑誌名: Archives of Insect Biochemistry and Physiology 69 ページ: 22-31
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nucleotide sequence analysis of PstI D fragment of Antheraea pernyi nucleopolyhedrvirus clone A and identification of Escherichia coli insertion sequence (2007)
  • 著者名/発表者名: Huang, Y., Mitsutake, H., Itakura, M., Wang, X., Kobayashi, J.
  • 雑誌名: International Journal of Wild Silkmoth & Silk 12 ページ: 1-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] 野蚕を宿主とするバキュロウイルスベクター系の魅力と実用化への挑戦 (2007)
  • 著者名/発表者名: 小林淳
  • 雑誌名: 蚕糸・昆虫バイオテック 76 ページ: 189-196
• [学会発表] 形質転換カイコ培養細胞のクローニングおよび導入遺伝子の安定性解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 光武宏, 小林淳
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第80回記念大会
  • 発表場所: 信州大学
  • 年月日: 2010-04-04
• [学会発表] カイコras遺伝子の解析とRasタンパク質の脂質修飾解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 塩月孝博, 坪田拓也, 守屋康子, 石橋直人, 八舟宏典, 小林淳, 鈴木崇, 小倉岳彦, 内海俊彦
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第80回記念大会
  • 発表場所: 信州大学
  • 年月日: 2010-04-03
• [学会発表] 昆虫培養細胞におけるDNV-2抵抗性および感受性遺伝子の発現 (2010)
  • 著者名/発表者名: 津田恵寛, 門野敬子, 城所久良子, 今西重雄, 伊藤克彦, 小林淳
  • 発表場所: 信州大学
  • 年月日: 2010-04-03
• [学会発表] サクサン核多角体病ウイルスの全ゲノム解読と他の分離株との比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 津田恵寛, Huang, Y., 光武宏, 板倉真, 王学英, 小林淳
  • 学会等名: 第54回日本応用動物昆虫学会大会
  • 発表場所: 千葉大学
  • 年月日: 2010-03-27
• [学会発表] 転移酵素mRNAを用いたpiggyBacで形質転換した昆虫細胞における転移酵素活性残存期間の短縮 (2009)
  • 著者名/発表者名: 光武宏, 小林淳
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-11
• [学会発表] Genome sequence of Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus used for baculovirus expression vector system (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuda, Y., Mitsutake, H., Itakura, M., Huang, Y., Wang, X., Kobayashi, J.
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-11
• [学会発表] Development of a novel preparation method of recombinant proteoliposomes using baculovirus gene expression systems (2009)
  • 著者名/発表者名: Fukushima, H., Mizutani, M., Imamura, K., Morino, K., Kobayashi, J., Okumura, K., Tsumoto, K., Yoshimura, T.
  • 学会等名: 第82回生化学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] 転移酵素mRNAを用いたpiggyBacによる昆虫培養細胞の形質転換技術の改良 (2009)
  • 著者名/発表者名: 光武宏, 小林淳
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第79回大会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2009-03-22
• [学会発表] バキュロウイルス遺伝子発現ベクター系を利用したDNV-2抵抗性遺伝子産物の生産 (2009)
  • 著者名/発表者名: 津田恵寛, 門野敬子, 城所久良子, 伊藤克彦, 小林淳
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第79回大会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2009-03-21
• [学会発表] BmDNV-2感受性遺伝子( +n s d- 2)の強制発現による感受性誘導の試み (2009)
  • 著者名/発表者名: 門野敬子, 城所久良子, 津田恵寛, 今井啓太, 光武宏, 小林淳, 伊藤克彦, 瀬筒秀樹, 内野恵郎, 小林功, 田村俊樹, 三田和英
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第79回大会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2009-03-21
• [学会発表] 転移酵素mRNAを用いたpiggyBacによる昆虫培養細胞の形質転換 (2008)
  • 著者名/発表者名: 光武宏, 小林淳
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] Attractive properties of baculovirus expression vector systems using wild silkmoths (2008)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi, J.
  • 学会等名: The 5th International Conference on Wild Silkmoths
  • 発表場所: Phoenix Hotel (瀋陽, 中国)
  • 年月日: 2008-09-10
• [学会発表] Effects of promoting protein on baculovirus susceptibility in Bombyx mori cell line NIAS-Ke-1 (2008)
  • 著者名/発表者名: Imai, K., Kanaya, T., Imanishi, S., Kobayashi, J
  • 学会等名: Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology
  • 発表場所: 名古屋大学
  • 年月日: 2008-03-22
• [学会発表] Performances of RAPD and DNA barcoding in idenfication and phylogenetic analysis of insect cell lines (2008)
  • 著者名/発表者名: Seto, H., Fukuhara, A., Imanishi, S., Kobayashi, J.
  • 学会等名: Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology
  • 発表場所: 名古屋大学
  • 年月日: 2008-03-22
• [学会発表] Improvement of piggyBac-mediated stable transformation of cultured insect cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Mitsutake, H., Kobayashi, J.
  • 学会等名: Asia-Pacific Congress of Sericulture and Insect Biotechnology
  • 発表場所: 名古屋大学
  • 年月日: 2008-03-22
• [学会発表] カイコバキュロウイルスベクター系を用いた殺虫剤抵抗性アセチルコリンエステラーゼの生産 (2007)
  • 著者名/発表者名: 板倉真, 冨田隆史, 古崎利紀, 日堂修, 河野義明, 小林淳
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第77回大会
  • 発表場所: 農林水産技術会議事務局筑波事務所
  • 年月日: 2007-04-04
• [学会発表] 新たに作出した数種昆虫培養細胞のRAPD分析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 福原明子, 小林淳, 今西重雄
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第77回大会
  • 発表場所: 農林水産技術会議事務局筑波事務所
  • 年月日: 2007-04-04
• [学会発表] piggyBacベクターの改変と形質転換カイコ培養細胞における染色体挿入特性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 光武宏, 小林淳
  • 学会等名: 日本蚕糸学会第77回大会
  • 発表場所: 農林水産技術会議
  • 年月日: 2007-04-04
• [図書] の事典(渡邉信ほか編)(III. 5. 7バキュロウイルスベクターによる有用タンパク質の生産) (2008)
  • 著者名/発表者名: 小林淳
  • 総ページ数: 294-295
  • 出版者: 朝倉書店(東京)
• [図書] バイオプロセスハンドブック(有限会社ブッカーズ編)(第1編第7章昆虫工学の基礎) (2007)
  • 著者名/発表者名: 小林淳
  • 総ページ数: 233-257
  • 出版者: NTS(東京)
• [備考]
  • URL: http://www.agr.yamaguchi-u.ac.jp/~member/kobayashi/p.html