研究課題/領域番号 |
18K05983
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研究機関 | 麻布大学 |
研究代表者 |
和久井 信 麻布大学, 獣医学部, 准教授 (40201157)
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研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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キーワード | 血管新生 / 血管内皮細胞 / 血管周細胞 / 細胞質突起相互陥入 |
研究実績の概要 |
ラットに熱可逆性ゲルポリマーを無菌的にインプラントし、同ゲルポリマー内にラットの毛細血管を誘導する。その後に、新生毛細血管を構成する血管内皮細胞と周細胞の変化動態について三次元超微形態学的に検討を行うことで、血管の新生メカニズムを解明することを目的として研究を行ってきたが、令和2年3月に本大学長から全動物実験中止勧告が出たために、全実験動物を淘汰したため、ラット実験肉芽組織モデルを作成することができなかったため。研究の予備検討を行った。 本検討では、 1)悪性腫瘍の血管熱感受培養ゲルThermoreversible Gel Dis Angiogenesis (TGA)の検討方法を改良した。BBN誘発ラット膀胱癌インプラント熱感受培養ゲルThermoreversible Gel Disc Angiogenic (TGA)の作製条件設定をおこなったが、新鮮組織が得ることができなかった。 2)TGA法で新生血管の安定増殖を確認した。その後に血管新制度と血管内皮細胞・周細胞質相互陥入Ednothelial Pericyte Interdigitation (EPI)等に関して三次元電顕免疫組織化学的・分子細胞学的解析を行い、血管新生制御におけるEPI systemにおけるCross-talkについて考察したが、動物実験中止勧告で新たな、組織がえられなかったので、研究は中断し、過去の標本の再確認を行った。 3)ラットBBN 誘発膀胱癌モデルを作成し、乳頭状膀胱癌を対象としてTGAを検討した。内径2mm長さ3mmのチューブ内にThermoreversible Gelを注入した後、チューブの編端は非溶解性血管培養ゲル(matori Gel)で塞ぎThermoreversible Gelの流出を防止した新たなTGA(TG-1)を考案したが、令和2年3月に本大学から全動物実験中止勧告が出たために、全実験動物を淘汰したため、ラット実験肉芽組織モデルを作成することはできなかった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
三次元マトリックス・ジェルは培養マトリックスとして開発されたジェルである。特性として、低温では流動性水溶性を示す。これに対し室温以上では流動性を示さない固形のハイドロゲルとなることが報告されている。すなわち、ハイドロゲル状態で各種細胞増殖因子・抑制因子を添加することが可能である。さらに、この変化は温度変化に対応するものであり、可逆的に繰り返し行うことができる。さらに、ジェル内において各種細胞が増殖可能であることから、ラット皮下に埋設することで周囲の生体に既存の血管構成細胞がジェル内に発育進入することが想定され、本検討ではこのジェル内で新生血管が発育進展することを確認するとともに、マトリックス・ピル作成のためジェル濃度の成作条件設定を変動させることから、新生血管の検討のための新規実験肉芽組織形成のモデルとして使用するための条件設定を行う予定であったが、令和2年3月に本大学から全動物実験中止勧告が出たために、全実験動物を淘汰したため、ラット実験肉芽組織モデルを作成することができなかったため。新鮮毛細血管がえることができなったので、新たな結果はえられなかった。
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今後の研究の推進方策 |
昨年度実施できなかった。動物実験を行い、N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine誘発ラット膀胱癌組織内にマトリックス・ピルを無菌的に埋没させ、新生血管のマトリックス・ピル内への誘導させたのちに、生体外に摘出して、培養することから新規実験肉芽組織形成のモデル開発の検討を行う。しかし、本年度は、以下の実験ができなかったため、新生血管のマトリックス・ピル内への誘導条件の策定から再度やりなおし、poly(A+)RNAを抽出希釈倍率と適切なマトリックス・ピルの生体内維持時間など作成条件設定を再度行う。
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次年度使用額が生じた理由 |
血管内皮細胞・周細胞相互陥入部Endothelial cell and pericyte interdigitation(EPI)は血管新生初期に比較にして血管新生成熟期に有意にその数が増加することを本研究者はラット実験肉芽組織モデルを用いて三次元電顕免疫学的に証明した。 しかし、令和2年3月に本大学から全動物実験中止勧告が出たために、全実験動物を淘汰したため、ラット実験肉芽組織モデルを作成することができなかったため。研究遂行が中断されたため、再度動物実験を再開したがモデル作成はえることができなった為。
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