| 研究課題/領域番号 |
18K06734
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
木内 文之 慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 教授 (60161402)
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| 研究分担者 |
植草 義徳 慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 助教 (30753024)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | フラボノイド / 抗炎症作用 / NO産生抑制 / オウゴン |
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| 研究実績の概要 |
オウゴンのフラボノイドと類似構造を有するB環に置換基を持たないフラボノイド類のうち、昨年度合成できなかった6-methoxywogonin（6MW）を含むA環に酸素置換基を3つまたは4つ持つメトキシフラボンを化学合成し、培養細胞（J774.1細胞）をリポ多糖（LPS）で刺激した際の一酸化窒素（NO）産生に対する抑制作用を検討した。これらのメトキシフラボン類は、chrysinを出発原料として、そのブロム化によって得た6,8-dibromo-5,7-dihydroxyflavoneから6MWを得て、これをメチル化或いは脱メチル化して得た。合成した化合物並びにbaicaleinを部分メチル化した化合物にオウゴンのフラボノイドを加えた10種のフラボンについて、リポ多糖誘導性NO産生抑制活性を評価した。合成した6MWは、オウゴンのフラボノイドの中では活性が弱く、oroxylin Aと同程度の活性を示した。昨年度解析した22種のフラボン類の構造活性相関では、6位にメトキシ基を有するフラボン類並びに5位にヒドロキシ基を持ち7位にメトキシ基を有するフラボン類に高い活性を示す傾向が認められたが、今年度の結果を合わせると、置換パターンによる統一的な傾向は認められず、酸素置換基を多数有するフラボン類は、異なる様々な段階においてNO産生に関連するシグナル伝達経路を阻害することが考えられた。一方、オウゴンのフラボノイド4種の等量混合物は、各フラボノイドの活性を平均した程度の活性を示し、NO産生抑制に対する阻害作用は相乗的ではなく相加的であった。また、オウゴンのフラボノイドであるbaicalinとNO産生抑制作用が知られているberberine並びにこれらの誘導体の水溶液中での相互作用を解析し、静電的相互作用並びに疎水性相互作用の役割を明らかにした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
「研究実績の概要」に記載したように、当初目的としていたフラボノイド類を化学合成により取得できたことから、まずNO産生抑制活性に関する構造活性相関並びにオウゴンのフラボノイドの混合による活性の変化を検討したが、明確な構造活性相関は見られず、混合による相乗的な効果も認められなかった。さらに、既にオウゴンのフラボノイドの相乗的効果が認められているプロスタグランジン（PG）産生について、各フラボノイド類がPG産生に関与するシグナル伝達経路に対しどのように影響にしているかを明らかにするため、各段階における関連タンパク質発現レベルを解析する準備を行っていたが、COVID-19の感染拡大の影響で実験を中断せざるを得なくなり、年度末を迎えた。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの研究で取得したフラボノイド類縁体を用いて、細胞評価系を用いてPG産生シグナル伝達経路に対する作用点を個々の化合物について明らかにする。特に、これまでの研究で検討されていないLPS刺激からPG産生に至るシグナル伝達経路の初期の段階に関与するリン酸化酵素および転写因子の発現量などを中心にシグナル伝達経路上の複数の段階を解析する。また、異なる作用点（作用メカニズム）を有する化合物を組み合わせた際のPG産生抑制作用の増強を定量的に解析し、相乗効果を生み出す因子を解析するとともに、低濃度で高い抗炎症効果を発揮するフラボノイド混合物の開発を行う。
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