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口腔レンサ球菌であるStreptococcus gordoniiは感染性心内膜炎の原因菌の一つとして知られている。感染性心内膜炎は、菌体が傷ついた心内膜に付着後、増殖して疣贅を形成するものだが、本疾患の発症には細菌が心内膜に付着するだけでなく、血流内に入った細菌が免疫細胞（好中球や単球など）による殺菌を受けずに生存していることが必須になる。S. gordoniiの一部の菌株が免疫細胞による殺菌を回避することは報告されているが、殺菌回避に関与する遺伝子の報告はこれまでにない。そこで本研究は、S. gordoniiで免疫細胞による殺菌を回避するために働く遺伝子を探索し、その機能解析を行なうことを目的とし、令和３年度は下記の研究を実施した。
① 好中球による殺菌の回避に働く遺伝子の探索を次世代シークエンス法により行った。病原性の高いS. gordonii DL1株と病原性の低いSK12株を用い、通常条件下または貪食食胞内を模倣した酸性条件下で培養した細菌からRNAを調製し、RNA-seq法により発現変動が見られる遺伝子の解析を行なった。さらに、DL1株とSK12株における遺伝子発現の違いを解析することで目的の機能を有していると推定される遺伝子の候補として57遺伝子を選定した。
② 昨年度までの研究結果をふまえ①で選定した57遺伝子の中から7遺伝子を機能解析の候補とし、S. gordonii DL1株を用いてその遺伝子をそれぞれ欠損している変異株を作製した。
③ ②で作製した遺伝子欠損変異株を用いて好中球による殺菌作用への抵抗性を検討した。作製した変異株のうち、数株は好中球による殺菌作用への抵抗性が減少していた。
このことから、②で選んだ７遺伝子の中に好中球による殺菌回避に関与しているものが存在する可能性が示唆される。
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