オルガノイドを用いた食道癌由来エクソソーム膜蛋白の網羅的解析とバイオマーカー探索

2022 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18K16307
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分55020:消化器外科学関連
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 原 豪男 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (00781775)
• 研究期間 (年度): 2021-11-01 – 2023-03-31
• キーワード: Organoid / Exosome / Biomarker / ESCC

研究成果の概要

食道扁平上皮癌患者由来オルガノイドの培養上清を回収して、Exosomeの分離を試みたが十分なExosomeの回収は困難であった。そこでまずオルガノイドの培養効率の引き上げを試みた。培養液中のp38 MAPK Inhibitorおよびいくつかの成分を除去することでオルガノイド形成率の改善を認めた。形成したオルガノイドはIHC, PCR, Western blottingにて評価し、患者検体の性質と相違がないことを確認した。さらに培養後の経時的な増殖能をWST-1 assayで評価し、Day7-11の培養上清がExosomeの回収に最も適していることを同定した。

自由記述の分野

Cancer biology

研究成果の学術的意義や社会的意義

オルガノイド培養では患者由来腫瘍細胞をディシュ上で培養し、直接アッセイに利用可能であり、将来的に個別化医療への応用も期待される。様々な癌腫でオルガノイド培養の報告があるが、食道扁平上皮癌(ESCC)に対する報告はほとんどなく、培養効率も不十分でさらなる改良が望まれる。
今回我々はオルガノイド培養からESCC由来のExosomeの分離を試みたが、培養効率が不十分で分離困難であった。しかしオルガノイド培地内の成長因子の調整で培養効率の改善が可能となった。本研究で改良されたオルガノイド培養は、Exosomeの分離のみならず、感受性試験やオルガノイドバンクといった様々な研究に応用可能と考えられる。