血管平滑筋細胞の形質転換機構の解明-調節因子としてのマイクロRNAの関与-

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19590240
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 中村 彰男 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (30282388)
• 研究分担者: 小濱 一弘 群馬大学, 大学院・医学研究科, 教授 (30101116) ; 石川 良樹 群馬大学, 大学院・医学研究科, 講師 (20212863) ; 岡垣 壮 三重大学, 大学院・生物資源学科, 教授 (80185412) ; 岸 博子 山口大学, 大学院・医学研究科, 講師 (40359899)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 血管平滑筋 / 細胞分化 / 脱分化 / マイクロRNA / 細胞遊走

研究概要

マイクロRNA(miRNA)は遺伝子の転写後にmRNAに結合してその翻訳を制御していて、細胞分化や癌化に深く関わっていると考えられている。血管平滑筋細胞(VSMC)の二つの表現型(収縮型と増殖型)に関わる遺伝子調節に関してはよくわかっていない。我々は、血小板由来増殖因子(PDGF)とナトリウム酪酸塩(NaB)がVSMCの脱分化と分化を誘導できる事を見つけた。これらの薬剤により誘導したVSMCからmiRNAを単離して、miRNAマイクロDNAアレイによりそれぞれの表現型で発現が上昇するmiRNAを網羅的に検索した。その結果、脱分化で顕著に発現が上昇する3種類のmiRNAを発見した。それぞれに関して、詳細な解析をしたところ、2つのmiRNAは脱分化を引き起こし、血管平滑筋細胞の細胞遊走能を促進する事がわかった。

研究成果

• [雑誌論文] Phosphatase coincident with cessation of cytoplasmic streaming in Physarum polycephalum (2010)
  • 著者名/発表者名: Okada, C., Nakamura, A., Tomioka, S., Kohama, K., Kaneko, T. S.
  • 雑誌名: Cell Biol.Int. (impress)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Calcium wave for cytoplasmic streaming of Physarum polycephalum (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyama, S., Ishigami, M., Nakamura, A., Kohama, K.
  • 雑誌名: Cell Biol. Int. 34 ページ: 35-40
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stimulatory effects of arachidonic acid on myosin ATPase activity and contraction of smooth muscle via myosin motor domain (2010)
  • 著者名/発表者名: Katayama, T., Watanabe, M., Tanaka, H., Hino, M., Miyakawa, T., Ohki, T., Ye, L-H., Xie, C., Yoshiyama, S., Nakamura, A., Ishikawa, R., Tanokura, M., Oiwa, K., Kohama, K.
  • 雑誌名: Am.J.Physiol.Heart Circ.Physiol. 298 ページ: H1505-514
  • 査読あり
• [雑誌論文] Calcium regulation of non-kinase and kinase activities of recombinant myosin light-chain kinase and its mutants (2009)
  • 著者名/発表者名: Xie, C., Zhang, Y., Wang, H., Matsumoto, A., Nakamura, A., Ishikawa, R., Yoshiyama, S., Hayakawa, K., Kohama, K., Gao, Y.
  • 雑誌名: IUBMB Life 61 ページ: 1092-1098
  • 査読あり
• [雑誌論文] Non-kinase Activity of MLCK in Elongated Filopodia Formation and Chemotaxis of Vascular Smooth Muscle Cells toward Sphingosylphosphorylcholine (2009)
  • 著者名/発表者名: Wang, H-H., Nakamura, A., Matsumoto, A., Yoshiyama, S., Qin, X., Ye, LH., Xe, C., Zhang, Y., Gao, Y., Ishikawa, R., Kohama, K.
  • 雑誌名: Am.J.Physiol.Heart Circ.Physiol. 296 ページ: H1683-1693
  • 査読あり
• [雑誌論文] The non-kinase activity of myosin light chain kinase in regulating smooth muscle contraction (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, A.
  • 雑誌名: Nippon Yakurigaku Zasshi. 133 ページ: 144-148
• [雑誌論文] Plectin 1 links intermediate filaments to costameric sarcolemma through β?synemin, α-dystrobrevin and actin (2008)
  • 著者名/発表者名: Hijikata, T., Nakamura, A., Isokawa, K., Imamura, M., Yuasa K., Ishikawa, R., Kohama, K., Takeda, S., Yorifuji, H.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 121 ページ: 2062-2074
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blebbistatin Inhibits the Chemotaxis of Vascular Smooth Muscle Cells through Breaking the Interaction between Myosin II and Actin (2008)
  • 著者名/発表者名: Wang, H-H., Tanaka, H., Qin, X., Zhao, T., Ye, L., Okagaki, T., Katayama, T., Nakamura, A., Ishikawa, R., Thatcher, S., Wright, G., Kohama, K.
  • 雑誌名: J.Physiol.Heart Circ. Physiol. 294 ページ: H2060-H2068
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of non-kinase activity of myosin light- chain kinase in regulating smooth muscle contraction, a review dedicated to Dr. Setsuro Ebashi (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, A., Xie, C., Zhang, Y., Gao, Y., Wang, H-H., Ye, L-H., Kishi, H., Okagaki, T., Yoshiyama, S., Hayakawa, K., Ishikawa, R., Kohama, K.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 369 ページ: 135-43
  • 査読あり
• [雑誌論文] Drebrin attenuates the interaction between actin and myosin-V. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa, R., Katoh, K., Takahashi, A., Xie, C., Oseki, K., Watanabe, M., Igarashi, M., Nakamura, A., Kohama K.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 359 ページ: 398-401
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of substrates for transglutaminase in Physarum polycephalum, an acellular slime mold, upon cellular mechanical damage (2007)
  • 著者名/発表者名: Wada. F., Hasegawa, H., Nakamura, A., Sugimura, Y., Kawai, Y., Sasaki, N., Shibata, H., Maki, M., Hitomi, K.
  • 雑誌名: FEBS J. 274 ページ: 2766-2777
  • 査読あり
• [学会発表] The novel calmodulin-binding site of the smooth muscle myosin light chain kinase (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, A., Matsumoto, A., Xie, C., Yoshiyama, S., Ishikawa, R., Kohama, K.
  • 学会等名: The 83^<rd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2010-03-16
• [学会発表] Insulin signaling of diabetic mother rats and their offspring (2010)
  • 著者名/発表者名: Nasu, R., Kohama, T., Nakamura, A., Kohama, K.
  • 学会等名: The 83^<rd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2010-03-16
• [学会発表] Calcium regulation of the ATPase activities of scallop and physarum myosins : role of essential light chain (2010)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Nakamura A., Kawamichi, H., Kohama K.
  • 学会等名: The 83^<rd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2010-03-16
• [学会発表] 非筋細胞ミオシンIIの10S構造形成に必要な尾部領域の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木卜貴之, 中村彰男, 矢澤道生, 村上洋太, 高橋正行
  • 学会等名: 2010年生体運動研究合同班会議
  • 発表場所: 東京(中央大学)
  • 年月日: 2010-01-09
• [学会発表] Structural and function of Physarum CBP40 (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura A.
  • 学会等名: 21^<th> IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 12^<th> FAOBMB Congress
  • 発表場所: Shanghai, China
  • 年月日: 20090802-20090807
• [学会発表] Calcium regulation of non-kinase and kinase activities of myosin light-chain kinase (2009)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Xie C., Matsumoto, A., Nakamura A., Zhao, Y., Kohama K., Gao Y.
  • 学会等名: 21^<th> IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 12^<th> FAOBMB Congress
  • 発表場所: Shanghai, China
  • 年月日: 20090802-20090807
• [学会発表] 平滑筋ミオシン軽鎖キナーゼの新しい機能の研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 謝策, 中村彰男, 小濱一弘
  • 学会等名: 第32回日本バイオレオロジー学会年会
  • 発表場所: 桐生市市民文化会館
  • 年月日: 20090604-20090605
• [学会発表] Non-kinase activity of MLCK in inducing filopodia and chemotaxis of vascular smooth muscle cells toward sphingosylphosphoryl- choline (2009)
  • 著者名/発表者名: Wang H.-H., Nakamura A., Matsumoto A., Yoshiyama S., Zin X., Ye L.-H., Xie C., Zhang Y., Gao Y., Ishikawa R., Kohama K.
  • 学会等名: The 82^<nd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20090316-20090318
• [学会発表] Cell motility of vascular smooth muscel cells exposed to the cigarette smoke components (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyama S., Wang H.-H., Nakamura A., Kohama K.
  • 学会等名: The 82^<nd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20090316-20090318
• [学会発表] Sliding of F-actin on myosin II under the conditions fully saturated with variety of actin-binding proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa R., Takahashi A., Nakamura A., Kohama K.
  • 学会等名: The 82^<nd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20090316-20090318
• [学会発表] The analysis of calcium inhibition by constructing hybrid myosins between physarum and smooth muscle myosins (2009)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Kawamichi H., Nakamura A., Nyitray L., Kohama K.
  • 学会等名: The 82^<nd> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20090316-20090318
• [学会発表] 種々のアクチン結合蛋白質が飽和結合する条件での in vitro motility assay (2009)
  • 著者名/発表者名: 石川良樹, 中村彰男, 小浜一弘
  • 学会等名: 2009年生体運動研究合同班会議
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090109-20090111
• [学会発表] Role of Essential Light Chain in Regulating the ATPase Activities of Scallop and Physarum Myosins (2009)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Nakamura A., Kawamichi, H., Kohama K.
  • 学会等名: 49^<th> American Society for Cell Biology Annual Meeting
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2009-12-06
• [学会発表] Characterization of the non-kinase activity of smooth muscle myosin light chain kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Xie C., Nakamura A., Zhang Y., Gao Y., Ishikawa R., Yoshiyama S., Kohama K.
  • 学会等名: 48^<th> annual meeting of the American Society for Cell Biology
  • 発表場所: San Francisco (Moscone Center)
  • 年月日: 20081213-20081217
• [学会発表] A novel phosphatase from Physarum polycephalum III (2008)
  • 著者名/発表者名: Okada C., Nakamura A., Yoshiyama S., Kohama K., Kaneko T.
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学大会合同大会
  • 発表場所: 神戸(神戸ポートアイランド)
  • 年月日: 20081209-20081212
• [学会発表] Actin-bundles as a transporter of nano-sized cargoes (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyama S., Ishikawa R., Nakamura A., Higashi-Fujime S., Takatsuki H., Rice K., Blough E. R., Kohama K.
  • 学会等名: 2^<nd> International Symposium on Bio-nano- systems
  • 発表場所: Tokyo(東京大学)
  • 年月日: 20081031-20081102
• [学会発表] In vitro sliding on myosin II of F-actin under the conditions fully saturated with variety of actin-binding proteins (2008)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa R., Takahashi A., Nakamura A., Kohama K.
  • 学会等名: 2^<nd> International Symposium on Bio-nano-systems
  • 発表場所: Tokyo(東京大学)
  • 年月日: 20081031-20081102
• [学会発表] Calcium inhibition of Physarum myosin in associated with its conformational change (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Nakamura A., Yoshiyama S., Kohama K., Kawamichi H., Farkas L., Nyitray L.
  • 学会等名: 2008第55回 北関東医学会総会
  • 発表場所: 群馬
  • 年月日: 20080925-20080926
• [学会発表] The non-kinase activity of myosin light chain kinase in regulating smooth muscle contraction (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura A., Xie C., Matsumoto A., Zhang Y., Gao Y., Kohama K.
  • 学会等名: 10^<th> Meeting of the European Calcium Society
  • 発表場所: Leuven, Belgium
  • 年月日: 20080917-20080920
• [学会発表] 平滑筋ミオシン軽鎖キナーゼの非キナーゼ活性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村彰男, 松本篤, 謝策, 張月, 吉山伸司, 小浜一弘
  • 学会等名: 第79回日本動物学会年会
  • 発表場所: 福岡(福岡大学)
  • 年月日: 20080905-20080907
• [学会発表] 質量分析装置を用いたミオシン軽鎖キナーゼのリン酸化部位の決定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村彰男, 岸博子, 松本篤, 石川良樹, 吉山伸司, 早川晃一, 小林誠, 小濱一弘
  • 学会等名: 第118回薬理学会関東部会・第10回応用薬理シンポジウム
  • 発表場所: 東京(星薬科大)
  • 年月日: 20080607-20080608
• [学会発表] The regulatory effect of Ca^<2+>/calmodulin on the actin-binding activity of smooth muscle myosin light chain kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y., Xie C., Nakamura A., Gao Y., Ishikawa R., Yoshiyama S., Matsumoto A., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Expression and characterization of the kinase-dead mutants of myosin light chain kinase (2008)
  • 著者名/発表者名: Xie C., Nakamura A., Zhang Y., Gao Y., Kawano K., Ishikawa R., Matsumoto A., Tanaka H., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Dynamics of actomyosin and intracellular Ca^<2+> during cell movement, in case of Physarum polycephalum (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyama S., Ishigami M., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Non-kinase activity of MLCK in elongated filopodia formation and chemotaxis of vascular smooth muscle cells in response to sphingosylphosphorylcholine (2008)
  • 著者名/発表者名: Wang H-H., Nakamura A., Matsumoto A., Hayakawa K., Yoshiyama S., Qin X., Tanaka H., Ye L., Li S., Ishikawa R., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Arachidonic acid binds to heavy chain of smooth muscle myosin and stimulates ATPase activity (2008)
  • 著者名/発表者名: Katayama T., Miyakawa T., Yoshiyama S., Nakamura A., Tanaka H., Tanokura M., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Brain specific actin-binding protein Drebrin inhibits the cofilin-dependent actin dynamics (2008)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa R., Katoh K., Ebihara S., Takahashi A., Igarashi M., Nakamura A., Kohama K.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Screening of phenotype-specific genes of vascular smooth muscle cell (VSMC) and their characterization (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto H., Nagahama R., Nakamura A., Kohama K., Okagaki T.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] The non-kinase activity of myosin light chain kinase in regulating smooth muscle contraction (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura A.
  • 学会等名: The 81^<st> Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20080317-20080319
• [学会発表] Blebbistatin inhibits the chemotaxis of vascular smooth muscle cells through breaking the interaction between smooth muscle myosin II and actin (2008)
  • 著者名/発表者名: Wang H-H., Tanaka H., Qin X., Zhao T., Lihong Ye, Okagaki T., Katayama T., Nakamura A., Ishikawa R., Thatcher S. E., Wright G. L., Kohama K.
  • 学会等名: The Joint Biophysical Society 52^<nd> Annual Meeting and 16th International Biophysics Congress
  • 発表場所: California
  • 年月日: 20080202-20080206
• [学会発表] ドレブリンによるコフィリン活性阻害 (2008)
  • 著者名/発表者名: 石川良樹, 海老原利枝, 加藤薫, 五十嵐道弘, 中村彰男, 小浜一弘
  • 学会等名: 2008年生体運動研究会合同班会議
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20080107-20080109
• [学会発表] Drebrin による ADF/cofilin 活性阻害 (2007)
  • 著者名/発表者名: 石川良樹, 加藤薫, 高橋あゆみ, 中村彰男, 小浜一弘
  • 学会等名: 第45回 日本生物物理学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071221-20071225
• [学会発表] A novel phosphatase from Physarum polycephalum II. (2007)
  • 著者名/発表者名: Okada, C., Nakamura, A., Yoshiyam, S., Kohama, K., Kaneko, K.
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-20071215
• [学会発表] 培養血管平滑筋細胞を使った形質変換特異的遺伝子のスクリーニング (2007)
  • 著者名/発表者名: 長濱良治, 宮本洋行, 中村彰男, 小濱一弘, 岡垣壮
  • 学会等名: 15^<th> 日本血管生物医学会学術大会
  • 発表場所: Fukuoka
  • 年月日: 20071129-20071130
• [学会発表] セリン・スレオニンキナーゼによるコンビナントミオシン軽鎖キナーゼのリン酸化部位の決定 (2007)
  • 著者名/発表者名: 中村彰男, 岸博子, 松本篤, 小林誠, 小濱一弘
  • 学会等名: 15^<th> 日本血管生物医学会学術大会
  • 発表場所: Fukuoka
  • 年月日: 20071129-20071130
• [学会発表] Determination of phosphorylation site of smooth muscle myosin light chain kinase by various Ser/Thr kinases (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, A., Kishi, H., Matsumoto, A., Ishikawa, R., Kobayashi, S., Kohama, K.
  • 学会等名: Joint meeting of the 40th Japanese Society of Developmental Biologists & the 59th Japan Society for Cell Biology
  • 発表場所: Fukuoka
  • 年月日: 20070528-20070530
• [学会発表] ドレブリンはアクチン細胞骨格流動促進因子コフィリンの活性を阻害する (2007)
  • 著者名/発表者名: 石川良樹, 中村彰男, 小浜一弘
  • 学会等名: 第117回薬理学会関東部会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-10-06
• [図書] Int.Rev.Cell Mol.Biol. 276(Cell and molecular biology of the fastest myosins) (2009)
  • 著者名/発表者名: Higashi-Fujime, S., Nakamura, A.
  • 総ページ数: 301-347