| 研究課題/領域番号 |
19K19036
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| 研究機関 | 東京歯科大学 |
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研究代表者 |
今村 健太郎 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (60755007)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | PD-1/PD-L1 / Porphyromonas gingivalis / 破骨細胞 / 歯周炎 / T細胞 |
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| 研究実績の概要 |
歯周病原細菌は，様々な方法で宿主の免疫応答から逃れ，病原性を発揮する事が知られている。これまで我々はPorphyromonas gingivalis が宿主細胞に侵入し，免疫応答を回避するメカニズムについて研究を進めてきた。近年，がん免疫においてプログラム細胞死-1 (programmed death-1, PD-1) /PD-リガンド-1 (programmed death ligand-1, PD-L1) 経路が，T細胞の機能抑制に重要な役割を果たしている事が注目されている。抗PD-L1抗体はがんの治療薬として，現在臨床試験が行われる段階まで研究が進んでいる。歯周病学の分野では，中等度歯周炎患者においてPD-L1の発現が上昇しているという報告はあるが，その詳細なメカニズムに関する基礎研究は行われていない。そこで本申請研究では，P. gingivalis の歯周炎局所におけるPD-1/PD-L1発現調整機構への関与を解明し，さらにPD-1/PD-L1経路遮断による歯周組織破壊への影響を検討する事を目的とする。
in Vitro:①ヒト歯肉上皮細胞（Ca9-22）にPorphyromonas gingivalis ATCC 33277を12時間感染させ，PD-L1遺伝子発現量の変化をqRT-PCRによって測定した。②P. gingivalis によるPD-L1発現の変化が，共培養したT細胞の活性に及ぼす影響をELISAによりINF-γを計測することにより評価した。③PD-L1による破骨細胞分化への影響をTRAP染色，破骨細胞分化マーカーを計測することで確認した。
in Vivo:全身麻酔下において，マウス上顎第2臼歯に絹糸（6-0）を結紮し，実験的歯周炎を惹起させた。処置後5日目に絹糸周囲の歯肉組織を採取し， PD-L1の遺伝子発現変化を健常
側と比較した。さらに，眼窩より採血を行い，血中濃度の変化を検討した。さらに，歯周炎による歯槽骨吸収量と破骨細胞数を計測した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画通り実験は遂行できている。
歯周病原細菌感染がPD-L1 の遺伝子発現量を上昇させ，歯周炎モデルマウスにおいてPD-L1 の遺伝子発現量が上昇した。歯周病においても，宿主細胞におけるPD-L1発現の上昇が，病態の慢性化に寄与している可能性があると考えられます。歯周病原細菌に感染した歯肉上皮細胞がT細胞の活性を抑制した。この宿主細胞上のPD-L1発現調節を介したP.gingibalisによるT細胞の活性化抑制は，歯周病原細菌の免疫回避システムに繋がると考えられます。
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| 今後の研究の推進方策 |
おおむね実験は順調に遂行されており，統計処理を行うのに十分なn数を得るために繰り返し実験を行っていく。
本年度中に論文投稿可能と考える。
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