研究課題/領域番号 |
19K19287
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研究機関 | 東京医科歯科大学 |
研究代表者 |
笠原 由紀 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 非常勤講師 (50822558)
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研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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キーワード | Dscr1 / ダウン症候群 / 骨芽細胞 |
研究実績の概要 |
ダウン症候群の患者には高頻度で顎顔面形態の不調和が起こる。ダウン症候群でトリソミーとなる21番染色体上にコードされるDown syndrome critical region1(Dscr1)にはカルシニューリン阻害活性があり、これが骨形成の不調和を引き起こす可能性について検討することとした。具体的には、Dscr1バリアント特異的な発現変調が骨芽細胞にいかなる影響をもたらすか?さらには、骨代謝機能にいかなる変化を与えるか?を解明することを目的とした。また、ダウン症の病態原理解析によって「骨形態形成不全への新たな治療標的の探索」を目標とした。本年度は、1. ウィルスベクターによる導入法を用いて樹立したDscr1.v1およびDscr1.v2過剰発現株(TMS-12細胞)を用いて石灰化能の検討、加えて骨髄由来単核球を用いた共培養を行い破骨細胞支持能について検討した。2.Dscr1タンパクの機能発現領域の特定を目的としたDscr1変異体安定発現株(TMS-12細胞)の樹立および石灰化能および破骨細胞支持能について検討した。3.TARGATTTM部位特異的遺伝子ノックインシステムを用いたDscr1.v2過剰発現トランスジェニックマウスの作成を行った。それぞれについて以下の成果を得た。1.石灰化能についてDscr1.v2過剰発現株に有意な変化を認めた。 2.目的とした8種のDscr1変異体安定発現株を樹立し、石灰化能および破骨細胞支持能について検討したが、機能発現領域の特定には至らなかった。3.Dscr1.v2過剰発現トランスジェニックマウスを作成し、各臓器にてDscr1.v2の特異的発現上昇を確認した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
Dscr1タンパクの機能発現領域の特定を目的として、樹立した数種のDscr1変異体安定発現株の石灰化能および破骨細胞支持能について検討したが、作成したDscr1変異体安定発現株においては有意な差が認められなかった。そのため、再度異なるDscr1変異体安定発現株の樹立を行なっている。
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今後の研究の推進方策 |
今年度は最終年度として以下の実験を予定している。 1.Dscr1.v2過剰発現トランスジェニックマウスの骨形態解析および組織学的解析を行う。 2.Dscr1.v2過剰発現トランスジェニックマウスの骨芽細胞を用いた石灰化能の検討および骨髄由来単核球を用いた破骨細胞形成能についての検討を行う。
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次年度使用額が生じた理由 |
当初目的としたDscr変異体安定発現株では機能発現領域の特定が行えなかったこと、およびトランスジェニックマウスの作成に困難を要し研究計画に遅れが生じたため。
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