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2022 年度 実施状況報告書

微生物のシデロフォアが関与するヨシの鉄プラーク形成機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 19K22151
研究機関筑波大学

研究代表者

山路 恵子  筑波大学, 生命環境系, 教授 (00420076)

研究分担者 田中 万也  国立研究開発法人日本原子力研究開発機構, 原子力科学研究部門 原子力科学研究所 先端基礎研究センター, 研究主幹 (60377992)
香西 直文  国立研究開発法人日本原子力研究開発機構, 原子力科学研究部門 原子力科学研究所 先端基礎研究センター, 研究主席 (80354877)
研究期間 (年度) 2019-06-28 – 2024-03-31
キーワードヨシ / 内生細菌 / 重金属
研究実績の概要

これまでの研究成果として、U鉱山の鉱さいたいせき場で自生している湿生植物のヨシは、Fe、Mn及びUを蓄積しており、ヨシは根の周囲に鉄プラーク(90%がフェリハイドライド)を形成することで、Uや金属元素の蓄積部位として機能している可能性を示した。今年度は、内生細菌のシデロフォアが関与した鉄プラークの形成機構の解明を中心とした研究を実施した。細菌の産生する代表的なシデロフォアにはcatechol骨格を有するものが多く存在するが、catechol骨格を有する化合物はFeと沈殿を生じるということが知られている。以上を踏まえ、調査地のヨシに確認された鉄プラークの形成に内生細菌の産生するシデロフォアが関与する可能性を考え、実験を行った。
根より内生細菌を分離し、シデロフォア産生能を確認したところ、分離された837菌株の内生細菌のうち88.6%に相当する742菌株がシデロフォア産生能を有していた。DNA解析による同定の結果、高いシデロフォア活性を示した上位10菌株はPseudomonas属細菌、Herbaspirillum属細菌、Rhizobium属細菌であった。これらの10種の内生細菌が産生するシデロフォアが鉄プラーク形成に寄与するか確認するため、Feイオン (Fe2+及びFe3+) と内生細菌の培養濾液を混合させたところ、Pseudomonas属細菌及びRhizobium属細菌の代謝産物がFeとの沈殿を形成させることが明らかとなった。また、HPLC分析の結果、Pseudomonas rhodesiae 3株、Pseudomonas protegens 1株、Rhizobium nepotum 1株の培養濾液からは保持時間及びUVスペクトルから同種と考えられるフェノール性化合物が検出された。以上のことから、内生細菌が産生するシデロフォアがヨシの鉄プラークの形成に関与する可能性が示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の目的に従い、内生細菌が産生するシデロフォアがヨシの鉄プラークの形成に関与する可能性を示すことができた。この点においては、目標を達成することできた。しかし、シデロフォアの分離には多少困難な点があり、同定まで至っていない。

今後の研究の推進方策

様々な分離モードを選択し、シデロフォアの分離を試みることで、分離精製することができればと考える。最終的には精製したシデロフォアを、機器分析(MS、NMR)に供することで同定を行うことができればと考える。

次年度使用額が生じた理由

当初の目的はほぼ達成できているが、内生細菌が産生するシデロフォアの同定があと少しで可能な状況にあるため、完遂をさせたいと考えている。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2023 2022

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Isoavenaciol and 7-hydroxy-isoavenaciol: Zn-chelating metallophores produced by root-endophytic Pezicula ericae in a Zn-accumulating plant, Aucuba japonica2023

    • 著者名/発表者名
      Doyama Kohei、Haruma Toshikatsu、Hishiyama Shojiro、Kato Atsushi、Masuya Hayato、Yamaji Keiko
    • 雑誌名

      Phytochemistry

      巻: 206 ページ: 113547~113547

    • DOI

      10.1016/j.phytochem.2022.113547

    • 査読あり
  • [学会発表] Elucidation of Heavy-metal Tolerance Mechanism in Phragmites australis (Cav.) Trin. ex Steud. without Iron Plaque Formation2022

    • 著者名/発表者名
      Miyu Okuma, Keiko Yamaji, Yukihiro Nakamoto, Kenjin Fukuyama, Yasumichi Tsunashima
    • 学会等名
      INTECOL 2022 Frontiers in Ecology: Science & Society
    • 国際学会
  • [学会発表] Heavy-Metal Accumulations in Phragmites australis Naturally Growing at Mill Tailings Pond; Iron Plaque Formation Related to Siderophores by Root-endophytic Bacteria2022

    • 著者名/発表者名
      Keiko Yamaji, Yukihiro Nakamoto, Kohei Doyama, Toshikatsu Haruma, Xingyan Lu, Kazuya Tanaka, Naofumi Kozai, Kenjin Fukuyama K4, Fukushima, and Yoshiyuki Ohara
    • 学会等名
      INTECOL 2022 Frontiers in Ecology: Science & Society
    • 国際学会

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公開日: 2023-12-25  

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