| 研究概要 |
本研究は、胸腺上皮細胞に発生学的・細胞生物学的に類似した表皮細胞を用いて胸腺様organoidを形成し、これにより目的とするヒトMHCに拘束した機能的T細胞を生成することを目的としている。前年度までに、同様のトライアルを行っている既知の論文報告(J.Clin. Invest2005 vol15, p3239)と同じ条件にて検討したところ、再現性が得られないことが判明しており、本年度は用いる細胞外基質、支持体表面構造、サイトカインの種類や量を様々に検討することによって、安定したorganoid形成に必要な条件の検討を行った。いくつかの条件でリンパ球と表皮細胞によるorganoid様の形成が認められたが、この中で完全にT細胞を分化させるには至っておらず、安定したorganoid構築が可能な培養系に対してさらに別の因子を添加することでT細胞の分化を促進させることができないか、さらに条件検討を行っている。同時に、humanCd34+細胞を免疫不全マウスに移植してT細胞を生成させる実験系(humanizedマウス作成)の立ち上げに着手した。humanCD34陽性細胞を1×10^5個2.5Gyの放射線照射した免疫不全マウスに移入し、末梢血へのhumanT細胞の出現を一定の間隔で検討している。現在の所、いくつかの個体で末梢血にT細胞が出現してきているが、死亡する個体も多いため、放射線照射の量などをもう少し検討する必要がある。最終年度には、この研究で構築したorganoidで得られたT細胞の機能を、humanized miceで発生させたT細胞の機能と比較検討する予定である。
|
