酵素の安定性を向上させる固定化技術の開発とマイクロリアクターへの応用

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20310074
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: マイクロ・ナノデバイス
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 宮崎 真佐也 独立行政法人産業技術総合研究所, 生産計測技術研究センター, 主任研究員 (70344231)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: マイクロ・ナノ化学 / 酵素反応 / マイクロリアクター / 固定化触媒 / 安定化

研究概要

本研究では、酵素とポリリジンなどカチオン性ポリマーの複合体を分子間架橋することによりマイクロチャネル表面に酵素を固定化する我々独自の技術を応用し、様々なポリエチレングリコール(PEG)化ポリマー等と酵素の複合体を形成させ架橋することにより、酵素の活性を損なわずに安定性を高める酵素固定化技術の開発を行うとともに、酵素反応マイクロ化学プロセスの構築に応用した。

研究成果

• [雑誌論文] Proteolysis approach without chemical modification for a simple and rapid analysis of disulfide bonds using thermostable protease-immobilized microreactors (2010)
  • 著者名/発表者名: 山口浩、宮崎真佐也、前田英明
  • 雑誌名: Proteomics 10巻 ページ: 2942-2949
• [雑誌論文] Multidigestion in continuous flow tandem protease-immobilized microreactors for proteomic analysis (2010)
  • 著者名/発表者名: 山口浩、宮崎真佐也、河済博文、前田英明
  • 雑誌名: Analytical Biochemistry 407巻 ページ: 12-18
• [雑誌論文] マイクロ空間を用いる有機合成反応 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也、前田英明
  • 雑誌名: 化学と教育 57巻 ページ: 364-367
• [雑誌論文] Rapid and efficient proteolysis for proteomic analysis by protease-immobilized microreactor (2009)
  • 著者名/発表者名: 山口浩、宮崎真佐也, ほか
  • 雑誌名: Electrophoresis 30巻 ページ: 3257-3264
• [雑誌論文] Polymer Chemistry in Microfluidic Reactor (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 雑誌名: Micro and Nanosystem 1巻 ページ: 193-204
• [雑誌論文] Enzymatic processing in microfluidic reactors (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 雑誌名: Enzymatic processing in microfluidic reactors 25巻 ページ: 405-428
• [雑誌論文] Biomolecular Synthesis in Microfluid (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也、前田英
  • 雑誌名: Encyclopedia of Micro-and Nanofluidics ページ: 76-84
• [学会発表] Simple and rapid proteolysis by protease-immobilized microfluidic reactor for proteomic analysis (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: 2010 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies (Pacifichem2010)
  • 発表場所: Honolulu, HI, U.S.A.
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] A simple and rapid analysis of disulfide bonds in proteins using thermostable proteaseimmobilized microfluidic reactors integrated with MS (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: The 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] マイクロ流体デバイスを用いたプロテオミクス解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也
  • 学会等名: 九州大学先導物質化学研究所・JST 先端計測合同シンポジウム
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20101000
• [学会発表] Enzymatic Conversion in Enzyme-Immobilized Microchannel Reactor with Cross-Linked Enzyme Membrane (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: 11th International Conference on Microreaction Technology (IMRET11)
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20100300
• [学会発表] マイクロ空間化学のバイオテクノロジーへの応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也
  • 学会等名: 第4回ナノバイオデバイスワークショップ
  • 発表場所: つくば市
  • 年月日: 2010-01-11
• [学会発表] Rapid Post-Translational Modification Analysis by Enzyme-Immobilized Microreactor (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: International Synposium on Microchemistry and Microsystems (ISMM2009)
  • 発表場所: 金沢市
  • 年月日: 20091100
• [学会発表] Cross-linked Aggregated Hydrogel Membrane Formation as Immobilization Method of Enzyme Onto Microchannel Surface (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: The IUMRS International Conference in Asia (IUMRS-ICA 2008)
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 20081200
• [学会発表] Protease-immobilized microreactor for rapid protein digestion (2008)
  • 著者名/発表者名: 宮崎真佐也, ほか
  • 学会等名: 17th Meeting of Methods in Protein Structure Analysis (MPSA2008)
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 20080800
• [図書] Limited proteolysis in proteomics using protease-immobilized microreactors.、Method in Molecular Biology Series-Functional Genomics, 2nd ed., (Kaufmann, M. and Klinger, C. eds)
  • 著者名/発表者名: 山口浩、宮崎真佐也、前田英明
  • 出版者: Humana Press (受理済)
• [備考] ホームページ
  • URL: http://unit.aist.go.jp/msrc/ci/index.html