放射線抵抗性細菌を用いた耐熱性タンパク質生産系の開発

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20780079
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 独立行政法人 日本原子力研究開発機構
• 研究代表者: 佐藤 勝也 独立行政法人 日本原子力研究開発機構, 量子ビーム応用研究部門, 研究員 (90370402)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2009
• キーワード: 生物工学 / 遺伝子工学 / 放射線抵抗性細菌 / 高度好熱菌 / 耐熱性タンパク質 / タンパク質生産系 / シャトルベクター / プロモーター配列

研究概要

従来法で生産が困難な高度好熱菌のタンパク質を放射線抵抗性細菌内で生産することのできる有用タンパク質生産系を開発するために、遺伝子発現に有用なプロモーター配列を探索し、発現プラスミドを作製した後、遺伝子発現解析を行った。その結果、従来の大腸菌を宿主とした発現系では、高度好熱菌タンパク質が不溶化するが、放射線抵抗性細菌を宿主として用いることで、不溶化することなくタンパク質の生産を確認することができた。

研究成果

• [雑誌論文] Deinococcus aetherius sp. nov., isolated from the stratosphere (2010)
  • 著者名/発表者名: Yinjie Yang, Takashi Itoh, Shin-ichi Yokobori, Haruo Shimada, Shiho Itahashi, Katsuya Satoh, Hirofumi Ohba, Issay Narumi, Akihiko Yamagishi
  • 雑誌名: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology Vol.60,No.4 ページ: 776-779
  • 査読あり
• [雑誌論文] Deinococcus aerius sp. nov., isolated from the high atmosphere (2009)
  • 著者名/発表者名: Yinjie Yang, Takashi Itoh, Shin-ichi Yokobori, Shiho Itahashi, Haruo Shimada, Katsuya Satoh, Hirofumi Ohba, Issay Narumi, Akihiko Yamagishi
  • 雑誌名: International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology Vol.59,No.8 ページ: 1862-1866
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of versatile shuttle vectors for Deinococcus grandis (2009)
  • 著者名/発表者名: Katsuya Satoh, Zhenli Tu, Hirofumi Ohba, Issay Narumi
  • 雑誌名: Plasmid Vol.62,No.1 ページ: 1-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Issay Narumi, Identification of PprM: a modulator of the PprI-dependent DNA damage response in Deinococcus radiodurans (2009)
  • 著者名/発表者名: Hirofumi Ohba, Katsuya Satoh, Haitham Sghaier, Tadashi Yanagisawa
  • 雑誌名: Extremophiles Vol.13,No.3 ページ: 471-479
  • 査読あり
• [雑誌論文] 放射線抵抗性細菌の放射線耐性の謎に迫る (2008)
  • 著者名/発表者名: 大庭寛史、佐藤勝也、鳴海一成
  • 雑誌名: 放射線と産業 Vol.118 ページ: 50-53
• [学会発表] 放射線抵抗性細菌における新規遺伝子操作系の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐藤勝也
  • 学会等名: 第10回極限環境微生物学会年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-28
• [学会発表] 放射線抵抗性細菌由来DNA修復促進タンパク質PprAの構造機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山田貢
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-21
• [学会発表] 放射線抵抗性細菌のプラスミドを用いた新規遺伝子操作系の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐藤勝也
  • 学会等名: 第4回高崎量子応用研究シンポジウム
  • 発表場所: 高崎
  • 年月日: 2009-10-09
• [学会発表] DNA鎖切断の効率的検出法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐藤勝也
  • 学会等名: 第8回産学官連携推進会議
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-06-20
• [学会発表] プロテオーム解析による新規DNA修復関連タンパク質の同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大庭寛史
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] 放射線抵抗性細菌デイノコッカス・ラジオデュランスの放射線応答機構に関与する新規タンパク質の発見 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大庭寛史
  • 学会等名: 第3回高崎量子応用研究シンポジウム
  • 発表場所: 高崎
  • 年月日: 2008-10-10
• [学会発表] 放射線抵抗性細菌のDNA修復機構の研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐藤勝也
  • 学会等名: 第39回UV/EB研究会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2008-09-24
• [学会発表] Role of RecF in radiation-induced DNA double-strand breaks repair pathway in Deinococcus radiodurans (2008)
  • 著者名/発表者名: Katsuya Satoh
  • 学会等名: The 7th International conference on Extremophiles (Extremophiles 2008)
  • 発表場所: Cape Town, South Africa
  • 年月日: 2008-09-09
• [学会発表] Functional characterization of a novel modulator for radiation response mechanism in Deinococcus radiodurans (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirofumi Ohba
  • 学会等名: The 7th International conference on Extremophiles (Extremophiles 2008)
  • 発表場所: Cape Town, South Africa
  • 年月日: 2008-09-09
• [学会発表] Three-dimensional architecture of the Deinococcus radiodurans PprA protein (2008)
  • 著者名/発表者名: Issay Narumi
  • 学会等名: The 7th International conference on Extremophiles (Extremophiles 2008)
  • 発表場所: Cape Town, South Africa
  • 年月日: 2008-09-09
• [備考]
  • URL: http://www.taka.jaea.go.jp/rab_div/grr/index_j.html