| 研究課題/領域番号 |
20K10207
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
高橋 一郎 九州大学, 歯学研究院, 教授 (70241643)
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| 研究分担者 |
寺尾 文恵 九州大学, 歯学研究院, 助教 (10510018)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 細胞増殖抑制 / II型コラーゲン / アルシアンブルー / ATDC5 / 下顎頭軟骨細胞 |
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| 研究実績の概要 |
下顎頭軟骨細胞の分化および下顎頭軟骨の成長発育過程におけるメカニカルストレス応答性のmiRNAとしてmechanosensitive miRNAの働きを解明することを目的として研究を開始した。スクリーニングにより5つの候補 miRNA を特定し、これら5つの候補 miRNA について、さらなる検討を行った。
まず、下顎頭軟骨原器由来間葉系幹細胞を採取して、5種類の mechanosensitive microRNA の発現解析を行った。これら5つの microRNA は胎生期の下顎頭軟骨分化初期にこう発現している2つ、胎生期から出生後の下顎頭軟骨分化中期に高発現している2つ、ならびに、成獣に達してから高発現する1つのおおむね3種類に大別することができた。本課題では胎生期から出生後の下顎頭軟骨分化中期に高発現する microRNAの機能を主に解析することが研究目的を達成するために重要であると考えている。
下顎頭軟骨における発現の特異性を検討するために、軟骨細胞株 ATDC5 を同時に用いて発現解析を行うとともに、スクリーニングによって見いだした5つの miRNA が、下顎頭軟骨の細胞増殖に影響を与えるか否かについて検討した。さらに、5つの microRNA 細胞培養系に添加し、細胞増殖ならびに軟骨細胞分化に対して与える影響を検討した。
今年度は、昨年同様の研究手法を用い、下顎頭軟骨原器由来間葉系幹細胞に miRXXX-5p mimicを導入した群において細胞増殖の統計学的に有意な低下が認められ、miRYYY-3p, ZZZ-5pおよびXXX-5p mimicを導入した群においてⅡ型コラーゲンなどを含む軟骨基質産生の有意な低下が認められることを示し、定量的な結果を確実なものとした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
一昨年度は、下顎頭軟骨細胞を胎齢14日マウス胎仔より採取して実験を行っていたが、昨年度、本年度は細胞数を十分得ることが可能な ATDC5 を主に使用して研究を進め、遅れを挽回するとともに、最終的な成果に近づきつつある。
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| 今後の研究の推進方策 |
ATDC5 などの細胞数を得られる細胞に置き換えて検索を続け、進捗状況をさらに改善する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
COVID-19 の流行ならびに研究協力者の進路変更により、実験回数が減少した。
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