研究課題/領域番号 |
20K11565
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研究機関 | 東京家政学院大学 |
研究代表者 |
海野 知紀 東京家政学院大学, 人間栄養学部, 教授 (90439753)
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研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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キーワード | カテキン / 尿毒素 / p-クレゾール / 腸内細菌 |
研究実績の概要 |
フェノール,p-クレゾールは腸内細菌が産生する尿毒素の一種であり,慢性腎臓病の憎悪因子として理解されている。食事成分として摂取したポリフェノール化合物は,その一部が大腸にまで到達し,大腸に生息している腸内細菌叢を改変させることが報告されている。そこで,本研究では緑茶に含まれるエピガロカテキンガレート(EGCG)の腸内細菌叢の改変作用に基づき,腸内細菌が産生するフェノール,p-クレゾール量に影響を及ぼす可能性について検討することを目的とした。 令和2年度は,フェノール,p-クレゾールを高感度に,かつ同時分析を可能とする測定条件を検討した。尿・血漿からは逆相用ポリマー系充填剤による固相抽出法により高い回収率を維持し,蛍光検出器を備えた高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による測定条件を確立した。また,β-グルクロニダーゼ,スルファターゼを用いた脱抱合処理によって,抱合型(グルクロン酸,硫酸)と遊離型を定量することが可能となった。 令和3年度は,ICRマウスにEGCGの配合量が異なる食餌を与え,上述の方法にて尿・血漿中のフェノール,p-クレゾールを定量した。その結果,EGCGの配合量依存的に尿中へのp-クレゾールの排出量が低下することが観察された。0.2%(w/w)を配合した食餌では,コントロール群と比較して有意な低下を認めた。さらに,EGCGをタンナーゼでエピガロカテキン(EGC)と没食子酸に加水分解した試料を作成し,これをEGCGと同様に0.2%(w/w)混餌した場合,p-クレゾールの尿中排泄量は低下しなかったことから,緑茶に含まれるカテキン種のうち,ガレート型カテキンであることの構造的有効性が示唆された。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
令和2年度は,固相抽出法を組み合わせた尿中のフェノール,p-クレゾールのHPLCによる測定条件を確立した。次に,実験動物を用いてEGCGの摂取試験を行い,有意な尿中p-クレゾールの低下を認めたが,腸内細菌叢への作用を介した効果を証明するために必要とされる菌叢変化を評価するには至らなかった。 このことを踏まえ,令和3年度は,EGCGの配合量依存的な効果を確認し,かつEGCGをタンナーゼで処理することによって効果が減衰することを明らかにした。さらには,採取した糞中の腸内細菌叢を解析し,p-クレゾール産生菌として理解されている腸内細菌の変動をモニターすることで,腸内細菌の尿毒素産生に対するEGCGの作用機序の一部を証明するに至った。一方,当初計画では,本研究課題において得られた成果について論文掲載することを予定していたものの,当該年度内において投稿には至らなかった。 以上より,当初計画された段階と比較して,研究成果の公表の観点からやや遅れていると判断した。
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今後の研究の推進方策 |
令和3年度は,EGCGが腸内細菌叢の改変を介したp-クレゾール産生抑制効果を明らかにした。令和4年度は,尿毒素の産生量低下と疾病予防との関連性を明確化していくため,糖尿病モデルマウス等を用い,EGCGによる疾病予防の機序を推定していく。また,令和4年度は,当該課題における最終年度になるため,研究成果の積極的な公表を進めていく。
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次年度使用額が生じた理由 |
令和3年度は,当初予定していた論文投稿まで至らず,そのため,論文掲載に係る支出がなかった。令和4年度は,当初より予定している疾患モデルマウスを用いた有効性評価を展開するとともに,研究成果について積極的に公表することを進めるべく,論文掲載に向けた助成金の支出も予定している。
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