|
腸管組織におけるマクロファージや樹状細胞によるIL-12/23の過剰産生が炎症性腸疾患(IBD)の発症に関与すると考えられている。IBDの根源 的な治療法として、IL-12/23の産生をRNA干渉薬で抑える方法が有効である可能性がある。
前年度は、マクロファージ様細胞株であるRaw264.7細胞にIL-12p40に対するsiRNAを封入したcharge-reversible脂質ナノ粒子(LNP)を投与することでIL-12p40の発現はコントロールと比べて有意に減少することが確認できた。また、LNPの表面をマンノシドで修飾することで、初代培養マクロファージへの取り込み率が有意に増加することが明らかになりました。最終年度は初代培養マクロファージ細胞に加え、マウス骨髄から採取した細胞を用い、樹状細胞への分化誘導を成功した。初代培養マクロファージと樹状細胞を用いて、蛍光標識siRNAを封入したマンノシド修飾LNPの各細胞への取り込み効率を評価することで、LNPのマンノシド修飾率および修飾方法の最適を行った。最後に初代培養マクロファージ及び樹状細胞への遺伝子ノックダウン効果をRT-PCR法で評価した。その結果、siRNA封入したマンノシド修飾LNPを各細胞に添加したところ、標的する遺伝子のmRNAの量が低下することが確認できた。以上のように、LNPを用いてIL-12p40に対する siRNAを炎症部位のマクロファージにデリバリーするための基盤を構築した。
|
