研究課題
まず予備研究として、未分化細胞特異的抗原遺伝子の候補として、奇形腫およびiPS細胞のRNAsequence解析によるスクリーニングを行い、肝細胞癌に特異的に発現する胎児性抗原であるGPC3を見いだした。申請者らが誘導したGPC3特異的CTLは、iPS細胞に対して細胞障害性が限定的でHLA拘束性があることから、共同研究者の河上らとGPC3に対するモノクロ抗体を作製し、これを利用したCAR-T療法の開発を開始した。まず、複数のiPS細胞株、iPS細胞からの各種分化細胞を樹立し、GPC3の発現解析を行ったところ、分化心筋細胞においてはGPC3の発現が低いことを確認し、樹立したGPC-CART細胞により、未分化細胞には細胞傷害能を示すが、移植に用いるiPS細胞由来心筋細胞に対しては細胞傷害能を示さないことを確認した（特許出願済）。すなわちGPC3を標的として、移植時の残存未分化細胞を特異的に除去できる可能性が示唆された。次にGPC3特異的CART療法による、実際の奇形腫形成抑制効果および副作用の有無をin vivoマウスモデルで確認した。申請者らは、iPS細胞を免疫不全マウスに移植し、奇形腫を形成させ、奇形腫におけるGPC3の発現を確認したところ、未分化状態と比較しても十分に高発現していること、さらに、これを申請者らの樹立したGPC3 特異的CAR-T細胞を投与することで、一旦形成された奇形腫を治療できることを確認した。すなわちiPS細胞由来の奇形腫に対して、GPC3 特異的CAR-T細胞が一定の治療効果を示すことをマウスモデルを用いて確認した。さらに申請者らはヒトの組織を移植し長期間評価できるヒト化マウスの樹立に成功した。今後は同マウスを用いて、iPS細胞由来心筋細胞を心臓へ移植し、GPC3特異的CAR-T細胞を用いて長期的な奇形腫形成の予防効果を確認する。
すべて 2022 2021
すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (10件)
Front Cardiovasc Med.
巻: 8 ページ: -
10.3389/fcvm.2021.806215.
STAR Protocols
巻: 3 ページ: -
10.1016/j.xpro.2022.101341.
Inflammation and Regeneration.
巻: 41 ページ: -
10.1186/s41232-021-00156-9.
J Mol Cell Cardiol.
巻: 164 ページ: 83-91
10.1016/j.yjmcc.2021.11.008.
10.3389/fcvm.2021.774389.
Methods Mol Biol.
巻: 2320 ページ: 11-21
10.1007/978-1-0716-1484-6_2.
Cancer Sci.
巻: 112 ページ: 3163-3172
10.1111/cas.15009.
巻: 112 ページ: 1390-1401
10.1111/cas.14812.
