研究課題
植物感染性線虫の農業被害は、年間数十兆円と試算されている。本研究では、植物感染性線虫の感染機構において、植物の線虫 誘引活性に注目し、植物と線虫の相互作用に関する研究を展開する。我々は、これまでに、生化学的精製やケミカルスクリーニングを行うことによって、サツマイモネコブセンチュウの植物誘引物質を複数単離してきている。本申請研究では、多くの線虫類のゲノム情報を用いて、誘引物質ー 受容体の組合せに関する情報量を増やし、誘引物質ー 受容体の組合せのバリエーションについて網羅的に理解することを目的としている。本研究により、誘引物質と受容体の分子進化について理解が得られ、どのように、線虫類が新たな植物を宿主として認識できるようになるのかが明らかとなると考えている。本年度は、バイオインフォマティックス的に、C.elegansのゲノム情報をもとに、植物感染性線虫の誘引物質の受容体候補を抽出した。まず、誘引物質の候補を以下のように抽出した。１；スクロースやグルコースなどの糖類やアルコール。２；バニリン酸やラウリン酸などの有機酸。３；バリンやアルギニンなどのアミノ酸。４；アセトシリンゴンやタンニン酸などのフェノール類。５；ルテオリン等のフラボノイド類。６；ストリゴラクトンやサリチル酸等の植物ホルモン。７；カダベリンやプテレシンなどのアミン類。８；オクトピンやマンノピン等のオピン類。さらに、これらの誘引物質に対する受容体候補を探索した。それぞれの誘引物質の受容体として以下の候補を得た。１；ChvE, McpE, McpS-McpZ。２；Mi-odr-3, Mi-tax-2, Mi-tax4。３；McpE, McpS-McpZ。４；Mi-odr-3, Mi-tax-2, Mi-tax4。６；Mi-odr-3, Mi-tax-2, Mi-tax4。７；McpX。今後、これらの機能解析を行う。
2: おおむね順調に進展している
我々が明らかにしてきた植物感染性線虫の誘引物質の受容体候補を、C.elegans の情報を基にバイオインフォマティックス的に抽出した。有力な候補遺伝子が１つと、他にも多数の候補遺伝子を抽出した。 また、その誘引物質受容体としての機能を試験するために、植物感染性線虫の形質転換系の開発をはじめた。線虫は根の中に潜り込むため、そとからのマイクロインジェクションは不可能である。そこで、VISUAL系を用いて、シャーレ内で植物を培養し、そこに感染させる系を試験した。現在のところ、線虫が培養葉に侵入することは確認したが、ネコブ形成などはまだ確認できていない
線虫の受容体候補が得られたため、植物感染性線虫の形質転換系の確立を目指す。現在、VISUAL系を用いて、葉の表面に線虫を感染させ、その線虫に、ニードルを使ってマイクロインジェクションすることにより形質転換することを予定している。また、植物感染性線虫の水耕栽培系をもちいて、成熟したメスで、卵を発生中のメスに形質転換できないかを検討する。
昨年度、フランスISA, コードダジュール大学に赴き、共同研究を実施する予定であったが、海外出張ができなかったため、その旅費とそれに伴う消耗品の支出ができず、繰り越しを行った。R3年度は、是非、フランス出張を行い、共同研究を進めたいと考えている。R3年度には、フランスで十分な時間をとり、共同研究を進めたいと考えている。また、オンラインで議論しつつ、共同研究は進めており、線虫の受容体の候補の絞り込みや、線虫の形質転換系の確立もすすめる。
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すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 3件、 査読あり 7件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件、 招待講演 2件)
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