ライブクレムを基盤とする分子特異的ナノイメージング法の開発

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21370094
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 細胞生物学
• 研究機関: 独立行政法人情報通信研究機構
• 研究代表者: 原口 徳子 独立行政法人情報通信研究機構, 未来ICT研究所, 上席研究員 (20359079)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 細胞構造・機能 / 蛋白質 / 生体分子 / バイオイメージング

研究概要

独自に開発してきたライブクレム法をさらに発展させ、接着性細胞以外にも適応できる、汎用性の高い分子特異的ナノイメージング法の開発を行った。本研究により、浮遊性細胞である分裂酵母や出芽酵母、遊走性の高いテトラヒメナ細胞に適応できるライブクレム法を確立した。また、蛍光画像と電顕画像との位置合わせの精度を格段に上げる方法を考案した。

研究成果

• [雑誌論文] Early entry and deformation of macropinosomes correlates with high efficiency of decaarginine-PEG-lipid-mediated gene delivery (2012)
  • 著者名/発表者名: S. Kobayashi, Y. Hattori, H. Osakada, M. Furuhata, K. Toma, Y. Maitani, Y. Hiraoka, T. Haraguchi
  • 雑誌名: The Journal of Gene Medicine 巻: 14 ページ: 262-271
  • DOI: doi:10.1002/jgm.2615
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transient Focal Membrane Deformation Induced by Arginine-rich Peptides Leads to Their Direct Penetration into Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: H. Hirose, T. Takeuchi, H. Osakada, S. Pujals, S. Katayama, I. Nakase, S. Kobayashi, T. Haraguchi, S. Futaki
  • 雑誌名: Molecular Therapy 巻: 20 ページ: 984-993
  • DOI: doi:10.1038/mt.2011.313
  • 査読あり
• [雑誌論文] 人工ビーズを用いた細胞の外来異物認識機構の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小林昇平、糀谷知子、小坂田裕子、森知栄、荒神尚子、平岡泰、原口徳子
  • 雑誌名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会誌 巻: 26 ページ: 21-22
• [雑誌論文] Physical breakdown of the nuclear envelope is not necessary for breaking its barrier function (2011)
  • 著者名/発表者名: H. Asakawa, Y. Hiraoka, T. Haraguchi
  • 雑誌名: Nucleus 巻: 2 ページ: 523-526
  • DOI: doi:10.4161/cib.4.3.14808
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inner Nuclear Membrane Protein Ima1 is Dispensable for Intranuclear Positioning of Centromeres (2011)
  • 著者名/発表者名: Y. Hiraoka, H. Maekawa, H. Asakawa, Y. Chikashige, T. Kojidani, H. Osakada, A. Matsuda, T. Haraguchi
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 16 ページ: 1000-1011
  • DOI: doi:10.1111/j.1365-2443.2011.01544.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nuclear translocation of RanGAP1 coincides with virtual nuclear envelope breakdown in fission yeast meiosis (2011)
  • 著者名/発表者名: H. Asakawa, Y. Hiraoka, T. Haraguchi
  • 雑誌名: Communicative & Integrative Biology 巻: 4 ページ: 4312-4314
  • DOI: doi:10.4161/cib.4.3.14808
  • 査読あり
• [雑誌論文] 核の構造と機能のダイナミックス (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 雑誌名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会誌 巻: 25 ページ: 25-26
• [雑誌論文] Virtual breakdown of the nuclear envelope in fission yeast meiosis (2010)
  • 著者名/発表者名: H. Asakawa, T. Kojidani, C. Mori, H. Osakada, M. Sato, D. Q. Ding, Y. Hiraoka, T. Haraguchi
  • 雑誌名: Current Biology 巻: 20 ページ: 1919-1925
  • DOI: doi:10.1016/j.cub.2010.09.070
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo evidence for the fibrillar structures of Sup35 prions in yeast cells (2010)
  • 著者名/発表者名: S. Kawai-Noma, C. G. Pack, T. Kojidani, H. Asakawa, Y. Hiraoka, M. Kinjo, T. Haraguchi, H. Taguchi, A. Hirata
  • 雑誌名: J. Cell Biol 巻: 190 ページ: 223-231
  • DOI: doi:10.1083/jcb.201002149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Artificial induction of autophagy around polystyrene beads in nonphagocytic cells (2010)
  • 著者名/発表者名: S. Kobayashi, T. Kojidani, H. Osakada, A. Yamamoto, T. Yoshimori, Y. Hiraoka, T. Haraguchi
  • 雑誌名: Autophagy 巻: 6 ページ: 36-45
  • DOI: doi:10.4161/auto.6.1.10324
  • 査読あり
• [雑誌論文] 人工ビーズを用いてオートファジーを視る顕微鏡 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林昇平、原口徳子
  • 雑誌名: 日本顕微鏡学会学会誌 巻: 45 ページ: 78-82
• [雑誌論文] ライブからライブCLEMへ-蛍光顕微鏡法と電子顕微鏡法との融合- (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 雑誌名: 蛋白質・核酸・酵素 巻: 54 ページ: 1784-1791
• [学会発表] Live CLEM (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 学会等名: 第18回細胞生物学ワークショップ
  • 発表場所: 北海道大学、北海道
  • 年月日: 2011-11-24
• [学会発表] The Nuclear Pore Complex Determines Nuclear Differentiation in Ciliate Tetrahymena thermophila (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, M. Iwamoto, F. Bunai, T. Koujin, H. Osakada, C. Mori, T. Kojidani, Y. Hiraoka
  • 学会等名: EMBO workshop "Mechanisms of Nucleocytoplasmic Trafficking"
  • 発表場所: Jerusalem Hills, Israel
  • 年月日: 2011-11-09
• [学会発表] The Nuclear Envelope Structures are Required for Maintenance of the Micronucleus Formed by Loss of Centromere Functions of a Human Artificial Chromosome (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, T. Koujin, H. Osakada, T. Kojidani, S. Kobayashi, M. Nakano, H. Masumoto, V. L. Larionov, W. C. Earnshaw, Y. Hiraoka
  • 学会等名: Nuclear envelope disease and chromatin organization
  • 発表場所: Robinson College, Cambridge, UK
  • 年月日: 2011-07-14
• [学会発表] 蛍光・電子顕微鏡両用プローブを用いた分子特異的ナノイメージング法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子、糀谷知子、淺川東彦、森知栄、小坂田裕子、小林昇平、平岡泰
  • 学会等名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会第27回学術講演会
  • 発表場所: 四国大学交流プラザ、徳島県
  • 年月日: 2011-05-14
• [学会発表] The Nuclear Pore Complex Determines Nuclear Differentiation in Ciliate Tetrahymena thermophila (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, M. Iwamoto, F. Bunai, T. Koujin, H. Osakada, C. Mori, T. Kojidani, Y. Hiraoka
  • 学会等名: International Symposium on the Physicochemical Field for Genetic Activities
  • 発表場所: Japan
  • 年月日: 2011-01-24
• [学会発表] 最先端の顕微鏡法で細胞分裂を見る兵庫県立須磨東高校インスパイア・ハイスクール事業 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 学会等名: 第2回特別授業
  • 発表場所: 兵庫県立須磨東高校、神戸市
  • 年月日: 2010-12-20
• [学会発表] Live CLEM (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 学会等名: 第16回細胞生物学ワークショップ
  • 発表場所: 北海道大学、札幌市
  • 年月日: 2010-11-25
• [学会発表] 電顕光顕統合イメージングとしてのライブクレム法とその応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 学会等名: 平成22年度生理学研究所研究会「電子顕微鏡機能イメージングの医学・生物学への応用-電顕・光顕による統合イメージング」
  • 発表場所: 岡崎コンファレンスセンター、愛知県
  • 年月日: 2010-10-05
• [学会発表] Live CLEM : An approach for observing molecular dynamics in high resolution (2010)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, T. Koujin, T. Kojidani, H. Osakada, S. Kobayashi, M. Iwamoto, F. Bunai, H. Asakawa, Y. Hiraoka
  • 学会等名: 日本顕微鏡学会第66回学術講演会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、愛知県
  • 年月日: 2010-05-26
• [学会発表] 人工染色体のセントロメア機能低下に伴って形成される微小核の細胞内動態と核膜構造 (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子,荒神尚子,小坂田裕子,糀谷知子,小林昇平,中野めぐみ,舛本寛, V. Larionov, W. C. Earnshaw,平岡泰
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、神奈川県
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] Live CLEM (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子
  • 学会等名: 第14回細胞生物学ワークショップ
  • 発表場所: 北海道大学、札幌市
  • 年月日: 2009-11-26
• [学会発表] Live CLEM : A new approach for observing molecular dynamics in high resolution (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, T. Koujin, T. Kojidani, H. Osakada, F. Bunai, M. Iwamoto, S. Kobayashi, H. Asakawa, Y. Hiraoka
  • 学会等名: 6^<th> International Symposium on Electron Microscopy in Medicine and Biology 2009
  • 発表場所: Centennial Hall, Kobe University, Japan
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] Live CLEM法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子、荒神尚子、糀谷知子、小坂田裕子
  • 学会等名: 第34回組織細胞化学講習会
  • 発表場所: 徳島大学、徳島県
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] Live CLEM : A New Approach for Observing Molecular Dynamics in High Resolution (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Haraguchi, T. Koujin, T. Kojidani, H. Osakada, S. Kobayashi, M. Iwamoto, F. Bunai, H. Asakawa, Y. Chikashige, Y. Hiraoka
  • 学会等名: The 9th NIBB-EMBL Symposium "Functional Imaging from Atoms to Organisms"
  • 発表場所: Okazaki Conference Center, Japan
  • 年月日: 2009-04-20
• [図書] Live CLEM法組織細胞化学2009日本組織細胞化学会編 (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口徳子、荒神尚子、糀谷知子、小坂田裕子(分担執筆)
  • 総ページ数: 149-157
  • 出版者: 学際企画
• [図書] 自己組織体としての細胞核自己組織化ハンドブック (2009)
  • 著者名/発表者名: 小林昇平、原口徳子(分担執筆)
  • 総ページ数: 306-312
  • 出版者: NTS出版
• [備考]
  • URL: http://www2.nict.go.jp/advanced_ict/bio/w131103/CellMagic/
• [産業財産権] 電子顕微鏡観察用サンプルの作製方法及びキット (2011)
  • 発明者名: 原口徳子
  • 権利者名: 独立行政法人情報通信研究機構
  • 産業財産権番号: 特許権、特願2011-008666
  • 出願年月日: 2011-01-19
• [産業財産権] Vrk1蛋白質抗体とその製造方法、抗原、検知方法 (2011)
  • 発明者名: 原口徳子、荒神尚子、平岡泰
  • 権利者名: 独立行政法人情報通信研究機構
  • 公開番号: 特許権、特開2011-11987
  • 取得年月日: 2011-01-20
• [産業財産権] Vrk1蛋白質抗体とその製造方法、抗原、検知方法 (2009)
  • 発明者名: 原口徳子、荒神尚子、平岡泰
  • 権利者名: 独立行政法人情報通信研究機構
  • 産業財産権番号: 特許権、特願2009-155028
  • 出願年月日: 2009-06-30