糖タンパク質糖鎖の酵素的導入による生体認識配糖体創製のための基盤構築

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21580117
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 伊藤 和央 大阪市立大学, 大学院・理学研究科, 准教授 (20183171)
• 連携研究者: 宮原 郁子 大阪市立大学, 大学院・理学研究科, 准教授 (40271176)
• 研究協力者: 浜口 祐 , 学生 ; 谷脇 聡 , 学生 ; 梅林 秀宇 , 学生 ; 岡 夕貴 , 学生 ; 後藤 眞璃子 , 学生 ; 篠原 かな子 , 学生 ; 劉 昊 , 学生 ; 海住 宜広 , 学生 ; 高谷 尚弥 , 学生 ; 竹内 朋史 , 学生 ; 吉田 達也 , 学生 ; 石井 麻衣子 , 学生 ; 高橋 剛生 , 学生
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 糖鎖 / 生体認識 / 酵素 / 配糖体

研究概要

糖鎖遊離酵素遺伝子の高発現系の構築とその精製に成功し、高純度の糖鎖遊離酵素の供給基盤を構築した。組換え糖鎖遊離酵素は、各種糖タンパク質からN結合型糖鎖を遊離し、糖鎖分析への有用性が示唆された。また、遊離糖鎖を転移し、生体認識配糖体合成が可能となった。変異導入糖鎖遊離酵素を作成し、酵素分子の機能領域を調べた。さらに、X線立体構造解析のために組換え糖鎖遊離酵素の結晶化に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Asparagine-linked oligosaccharide-releasing enzymes produced by basidiomycetes : Tasuku Hamaguchi (2011)
  • 著者名/発表者名: Yukako Inoue, Tsukasa Ito, Kanako Shinohara, Satoshi Taniwaki, Nobuhiro Kaizumi, Hiromoto Hisada, Yoji Hata, Tipaporn Limpaseni, Piamsook Pongsawasdi, and Kazuo Ito
  • 雑誌名: Oyotositukagaku 巻: 1 ページ: 159-167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of epicatechin glucosides by aυ-cyclodextrin glycosyltransferase : Pornpun Aramsangtienchai (2011)
  • 著者名/発表者名: Warinthorn Chavasiri, Kazuo Ito and Piamsook Pongsawasdi
  • 雑誌名: Journal of Molecular Catalysis B : Enzymatic 巻: 73 ページ: 27-34
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular and biochemical characterization of levansucrase from Bacillus licheniformis RN-01.Santhana Nakapong, Rath Pichyangkura (2011)
  • 著者名/発表者名: Masaru Iizuka, Kazuo Ito and Piamsook Pongsawasdi.
  • 雑誌名: The 3^<rd> Biochemistry and Molecular Biology International Conference, Chiang Mai ページ: 6-8
• [雑誌論文] Synthesis of a novel prebiotic trisaccharide by a type Iτ-glucosidase from B. licheniformis strain TH4-2 : P. Nimpiboon (2011)
  • 著者名/発表者名: Santhana Nakapong, Rath Pichyangura, Kazuo Ito, and Piamsook Pongsawasdi
  • 雑誌名: Process Biochem 巻: 46 ページ: 448-457
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of cellobiose-containing oligosaccharides by Intermolecular transglucosylation of cyclodextrin glycosyltransferase from Paenibacillus sp A11 : Wannapa Wongsangwattana (2010)
  • 著者名/発表者名: Jarunee Kaulpiboon, Kazuo Ito, and Piamsook Pongsawasdi
  • 雑誌名: Process Biochemistry 巻: 45 ページ: 947-953
  • 査読あり
• [雑誌論文] Purification, Characterization and Molecular Cloning of a Novel Endo-υ-N-acetylglucosaminidase from the Basidiomycete, Flammulina velutipes (2010)
  • 著者名/発表者名: Tasuku Hamaguchi, Tsukasa Ito, Yukako Inoue, Tipaporn, Limpaseni, Piamsook Pongsawasdi, and Kazuo Ito
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 1 ページ: 420-432
  • 査読あり
• [学会発表] 担子菌Agaricus bisporus由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼABの遺伝子クローニングに関する研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高橋剛生、谷脇聡、浜口祐、岡夕貴、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、TipapornLimpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2012年日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-03-25
• [学会発表] 担子菌Flammulina velutipes由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼFVのプロセシング酵素の精製とその同定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 海住宜広、浜口祐、後藤眞璃子、KuakarunKrusong、Jarunee aulpiboon Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2012年日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-03-25
• [学会発表] 担子菌Flammulina velutipes由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼFV遺伝子の酵母での発現とX線結晶構造解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 浜口祐、海住宜広、篠原かな子、宮原郁子、田中里佳、Kuakarn Kursong、Jarnee Kaurpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2012年日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-03-25
• [学会発表] 担子菌Flammulina. velutipesにおけるアスパラギン結合型糖鎖遊離酵素のプロセシング酵素 (2011)
  • 著者名/発表者名: 海住宜広、濱口祐、久田博元、秦洋二、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-22
• [学会発表] 担子菌由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼFV遺伝子の酵母での発現と発現酵素の性質 (2011)
  • 著者名/発表者名: 浜口祐、海住宜広、篠原かな子、Kuakarn Kursong、Jarnee Kaurpiborn、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-22
• [学会発表] 担子菌Flammulina. velutipesにおけるアスパラギン結合型糖鎖遊離酵素のプロセシング (2011)
  • 著者名/発表者名: 海住宜広、濱口祐、久田博元、秦洋二、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第58回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-05-21
• [学会発表] Molecular and biochemical characterization of levansucrase from Bacillus licheniformis RN-01 (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakapong, S., Pichyangkura, R., Iizuka, M., Ito, K., and Pongsawasdi, P.
  • 学会等名: The 3^<rd> Biochemistry and Molecular Biology International Conference
  • 発表場所: Chiang Mai, Thailand
  • 年月日: 2011-04-20
• [学会発表] 担子菌Agaricus bisporus由来エンド-.-N-アセチルグコサミニダーゼABの精製とその特異性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 谷脇聡、濱口祐、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2011年日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] 担子菌Agaricus bisporus由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼABの精製とその性質 (2010)
  • 著者名/発表者名: 谷脇聡、濱口祐、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、PiamsookPongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第83回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] Comparative study of basidiomycetes endoglycosidases acting on asparagine-linked oligosaccharides (2010)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Taniwaki, Tasuku Hamaguchi, Kuakarun Krusong, Jarunee Kaulpiboon, Tipaporn Limpaseni, Piamsook Pongsawasdi, and Kazuo Ito
  • 学会等名: The 2nd ACP Joint Seminar
  • 発表場所: Khon Kaen, Thailand
  • 年月日: 2010-11-21
• [学会発表] Mutation at subsite+2 asparagine residue of levansucrase caused the change in product size of levan (2010)
  • 著者名/発表者名: Santhana Nakapong, Rath Pichyangkura, Masaru Iizuka, Kazuo Ito and Piamsook Pongsawasdi
  • 学会等名: The 2nd ACP Joint Seminar
  • 発表場所: Khon Kaen, Thailand
  • 年月日: 2010-11-21
• [学会発表] Characterization of amylomaltase from Thermus filiformis (2010)
  • 著者名/発表者名: Kuakarun Krusong, Piriya Kaewpathomsri, Jarunee Kaulpiboon, Kazuo Ito, Shuichiro Murakami, and Piamsook Pongsawasdi
  • 学会等名: The 2nd ACP Joint Seminar
  • 発表場所: Khon Kaen, Thailand
  • 年月日: 2010-11-21
• [学会発表] Characterization of transglycosylation products of recombinant cyclodextringlycosyltransferase from Paenibacillus sp. BT01 (2010)
  • 著者名/発表者名: Prapai Hongsa, Kazuo Ito and Tipaporn Limpaseni
  • 学会等名: The 2nd ACP Joint Seminar
  • 発表場所: Khon Kaen, Thailand
  • 年月日: 2010-11-21
• [学会発表] 担子菌Agaricus bisporusの産生する糖タンパク質糖鎖遊離酵素の精製とその特異性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 谷脇聡、濱口祐、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2010年度日本農芸化学会関西支部大会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2010-10-02
• [学会発表] 担子菌の産生するアスパラギン結合型糖鎖遊離酵素系 (2010)
  • 著者名/発表者名: 濱口祐、井上裕香子、伊藤司、篠原かな子、谷脇聡、海住宜広、久田博元、秦洋二、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第18回糖質関連酵素化学シンポジウム
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2010-09-17
• [学会発表] 担子菌Agaricus bisporus由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼABの精製とその性質 (2010)
  • 著者名/発表者名: 谷脇聡、濱口祐、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 第57回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2010-05-22
• [学会発表] 担子菌由来ペプチドN-グリカナーゼの多様性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 篠原かな子、井上裕香子、小島美保子、濱口祐、伊藤和央
  • 学会等名: 第11回関西グライコサイエンスフォーラム
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-05-15
• [学会発表] 担子菌由来新規ペプチドN-グリカナーゼFV遺伝子のクローニングに関する研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 篠原かな子、井上裕香子、濱口祐、Kuakarun Krusong、Jarunee Kaulpiboon、Tipaporn Limpaseni、Piamsook Pongsawasdi、伊藤和央
  • 学会等名: 2010年日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] 担子菌由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼの発現系構築と発現酵素の性質 (2009)
  • 著者名/発表者名: 濱口祐、谷脇聡、海住宜広、久田博元、秦洋二、伊藤和央
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会中国四国・近畿支部合同シンポジウム
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2009-11-21
• [学会発表] 担子菌Flammulina velutipes由来ペプチドN-グリカナーゼの精製と遺伝子クローニング (2009)
  • 著者名/発表者名: 濱口祐、井上裕香子、篠原かな子、谷脇聡、伊藤和央
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] 担子菌由来エンド-.-N-アセチルグルコサミニダーゼ遺伝子の発現系の構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 濱口祐、谷脇聡、久田博元、泰洋二、伊藤和央
  • 学会等名: 第56回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-07-18
• [図書] Enzymatic Synthesis of Linear, Cyclic and Complex Type Oligosaccharides, Piamsook Pongsawasdiand, in Oligosaccharides : Sources, Properties and Applications Nicole S. Gordon ed (2011)
  • 著者名/発表者名: Kazuo Ito
  • 総ページ数: 109-134
  • 出版者: Nova Science Publishers