糖ペプチド型分子プローブを用いた細胞内PNGaseのリアルタイム解析

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21580410
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 松尾 一郎 群馬大学, 大学院・工学研究科, 教授 (40342852)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 糖鎖 / 有機合成 / 糖アミノ酸 / PNGase / 分子プローブ / N-結合型糖鎖

研究概要

細胞内ペプチドN-グリカナーゼ(PNGase)は不要糖タンパク質からN-型糖鎖を遊離させる酵素であり、タンパク質の品質管理機構に関わる分子として注目されている。本研究ではPNGase活性を高感度に検出するために、還元末端にクロロアセタミド基を、非還元末端側の4位にプロパルギル基を有するキトビオース誘導体をデザイン、合成した。クリック反応により蛍光性置換基を導入、得られたプローブはPNGaseの脱糖鎖活性をμMオーダーで阻害した。

研究成果

• [雑誌論文] Synthesis of a Versatile Probe for Analysis of Cytoplasmic Peptide-N-Glycanase (2012)
  • 著者名/発表者名: M. Masuda, S. Miyazawa, Y. Ito, I. Matsuo
  • 雑誌名: J. Chine. Chem. Soc. 巻: 59 ページ: 269-272
  • 査読あり
• [雑誌論文] 糖タンパク質糖鎖の精密合成と生体機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 松尾一郎
  • 雑誌名: 横浜市立大学論叢 自然科学系列 巻: 61 ページ: 161-177
• [雑誌論文] Evidence for an Essential Deglycosylation-Independent Activity of PNGase in Drosophila melanogaster (2010)
  • 著者名/発表者名: Y. Funakoshi, Y. Negishi, JP. Gergen, J. Seino, K. Ishii, WJ. Lennarz, I. Matsuo, Y. Ito, N. Taniguchi, T. Suzuki
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 5 ページ: e10545
  • 査読あり
• [学会発表] LacdiNAc構造を有する複合型糖鎖の効率的合成 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮沢進平, 真下竜也, 松尾一郎
  • 学会等名: 日本農芸化学会2012年度大会
  • 発表場所: 京都女子大学(京都)
  • 年月日: 2012-03-24
• [学会発表] 細胞内PNGase解析のための糖鎖分子プローブの合成 (2011)
  • 著者名/発表者名: 益田瑞穂, 鈴木匡, 伊藤幸成, 松尾一郎
  • 学会等名: 日本農芸化学会2011年度大会
  • 発表場所: 京都女子大学(京都)
  • 年月日: 20110325-28
• [学会発表] 細胞内PNGaseの機能解明向けた糖鎖分子プローブの合成 (2011)
  • 著者名/発表者名: 益田瑞穂, 宮沢進平, 伊藤幸成, 松尾一郎
  • 学会等名: 日本化学会関東支部群馬地区地域懇談会
  • 発表場所: 群馬大学工学部(桐生)
  • 年月日: 2011-12-10
• [学会発表] LacdiNAc構造を有するN-結合型糖鎖の合成研究 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮沢進平, 伊藤幸成, 松尾一郎
  • 学会等名: 日本化学会関東支部群馬地区地域懇談会
  • 発表場所: 群馬大学工学部(桐生)
  • 年月日: 2011-12-10
• [学会発表] Synthesis of probes for the analysis of PNGase activity (2010)
  • 著者名/発表者名: M. Masuda, K. Yamada, H. Oku, Y. Ito, I. Matsuo
  • 学会等名: 2010環太平洋国際化学会議PACIFICHEM2010
  • 発表場所: ハワイコンベンションセンター (ホノルル)
  • 年月日: 2010-12-16
• [学会発表] Fluorescently labeled glyco-molecule probe for analysis activity of PNGase (2010)
  • 著者名/発表者名: M. Masuda, T. Suzuki, Y. Ito, I. Matsuo
  • 学会等名: International Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉)
  • 年月日: 2010-08-02
• [学会発表] 細胞内Peptide-N-Glycanase解析のための糖鎖分子プローブの合成 (2010)
  • 著者名/発表者名: 益田瑞穂, 鈴木匡, 伊藤幸成, 松尾一郎
  • 学会等名: 平成22年度日本生化学会関東支部例会
  • 発表場所: 長岡技術科学大学(長岡)
  • 年月日: 2010-05-29
• [図書] バイオ医薬品開発における糖鎖技術 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松尾一郎
  • 出版者: シーエムシー出版