C型肝炎ウイルス複製複合体に含まれる蛋白の同定とウイルス複製における役割の解析

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21590867
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 相崎 英樹 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 室長 (00333360)
• 研究分担者: 鈴木 哲朗 浜松医科大学, 感染症講座, 教授 (00250184)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: ウイルス / 感染症 / 癌 / 内科 / プロテオーム

研究概要

プロテオミクス技術を利用してHCVの複製複合体(RC)を構成する宿主因子を同定し、その機能解析を行った。レプリコン細胞を対数増殖期と非増殖期からそれぞれ回収し、HCV RCを含む膜分画を粗精製し質量分析法によってHCV RC分画に含まれる宿主因子を同定し、その中にはCCT5が含まれていた。免疫沈降法によりCCT5がHCVNS5Bと結合し、CCT5siRNAによってHCV RNA複製が低下するなどを見出した。CCT5がNS5Bとの結合を介してHCV RCへ取り込まれRNA複製調節に関与する可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Japanese reference panel of blood specimens for evaluation of hepatitis C virus RNA and core antigen quantitative assays (2012)
  • 著者名/発表者名: Murayama A, Sugiyama N, Watashi K, Masaki T, Suzuki R, Aizaki H, Mizuochi T, Wakita T, Kato T
  • 雑誌名: J Clin Microbiol 巻: 50 ページ: 1943-9
• [雑誌論文] Visualization and Measurement of ATP Levels in Living Cells Replicating Hepatitis C Virus Genome RNA (2012)
  • 著者名/発表者名: Ando T, Imamura H, Suzuki R, Aizaki H, Watanabe T, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: PLOS Pathogen 巻: 8 ページ: e1002561
• [雑誌論文] The structural requirements of virion-associated cholesterol for infectivity, buoyant density and apolipoprotein association of hepatitis C virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Aizaki H, Fukasawa M, Teraoka T, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: J Gen. Virol 巻: 92 ページ: 2082-1
• [雑誌論文] Hepatitis C virus RNA replication in human stellate cells regulates gene expression of extracellular matrix-related molecules (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Aizaki H, Matsuura T, Kojima S, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 407 ページ: 135-40
• [雑誌論文] Chaperonin TRiC/CCT participates in replication of hepatitis C virus genome via interaction with the viral NS5B protein (2011)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Aizaki H, Hara H, Matsuda M, Ando T, Shimoji T, Murakami K, Masaki T, Shoji I, Homma S, Matsuura Y, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: Virology 巻: 410 ページ: 38-47
• [雑誌論文] Identification of hepatitis C virus genotype 2a replicon variants with reduced susceptibility to ribavirin (2010)
  • 著者名/発表者名: Hmwe SS, Aizaki H, Date T, Murakami K, Ishii K, Miyamura T, Koike K, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: Antiviral Res 巻: 85 ページ: 520-524
• [雑誌論文] Production of infectious hepatitis C virus by using RNA polymerase I-mediated transcription (2010)
  • 著者名/発表者名: Masaki T, Suzuki R, Saeed M, Mori KI, Matsuda M, Aizaki H, Ishii K, Maki N, Miyamura T, Matsuura Y, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: J Virol 巻: 84 ページ: 5824-5835
• [雑誌論文] SYNCRIP(synaptotagmin-binding, cytoplasmic RNA-interacting protein) is a host factor involved in hepatitis C virus RNA replication (2009)
  • 著者名/発表者名: Liu HM, Aizaki H, Choi KS, Machida K, Ou JJ, Lai MM
  • 雑誌名: Virology 巻: 386 ページ: 249-256
• [雑誌論文] Proteomics analysis of mitochondrial proteins reveals overexpression of a mitochondrial protein chaperone, prohibitin, in cells expressing hepatitis C virus core protein (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumi T, Matsuda M, Aizaki H, Moriya K, Miyoshi H, Fujie H, Shintani Y, Yotsuyanagi H, Miyamura T, Suzuki T, Koike K
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 50 ページ: 378-386
• [雑誌論文] Evaluation of hepatitis C virus core antigen assays in detecting recombinant viral antigens of various genotypes (2009)
  • 著者名/発表者名: Saeed M, Suzuki R, Kondo M, Aizaki H, Kato T, Mizuochi T, Wakita T, Watanabe H, Suzuki T
  • 雑誌名: J Clin Microbiol 巻: 47 ページ: 4141-4143
• [学会発表] Identification of lipid droplet-associated membrane proteins that are involved in HCV production (2011)
  • 著者名/発表者名: Aizaki H, Matsumoto Y, Goto K, Watashi K, Suzuki R, Fukasawa M, Hanada K, Sato S, Takahashi N, Matsuura Y, Motojima K, Miyamura T, Suzuki T, WakitaT
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Identification and functional analysis of small molecules inhibiting the late step of hepatitis C virus life cycle (2011)
  • 著者名/発表者名: Watashi K, Uchida N, Suzuki R, Aizaki H, Wakita T
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Discovery of full-length HCV genome quasispecies by deep sequencing (2011)
  • 著者名/発表者名: Ando T, Aizaki H, Sugiyama M, Mizokami M, Sekizuka T, Kuroda M, Wakita T
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Identification of novel NS5A-associated proteins in the host-cell membrane fraction and their role in HCV life cycle (2011)
  • 著者名/発表者名: Goto K, Kimura T, Watashi K, Suzuki R, Yamagoe S, Miyamura T, Moriya K, Yotsuyanagi H, Koike K, Suzuki T, Wakita T, Aizaki H
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Halopemide inhibited a post-assembly step in hepatitis C virus life cycle (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchida N, Watashi K, Suzuki R, Aizaki H, Chiba J, Wakita T
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Signal peptidase complex 1 participates in the assembly of hepatitis C virus through an interaction with NS2 (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki R, Suzuki T, Saito K, Matsuda M, Watashi K, Matsuura Y, Wakita T, Aizaki H
  • 学会等名: 18^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: WA, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Screening of small molecules affecting the production of hepatitis B virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Watashi K, Uchida N, Suzuki R, Aizaki H, Wakita T
  • 学会等名: International meeting of molwcular biology of hepatitis B virus
  • 発表場所: Florida, USA
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Identification of host factor that interacts with hepatitis C virus NS2 protein and is involved in the viral assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki R, Suzuki T, Saito K, Matsuda M, Watashi K, Matsuura Y, Wakita K, Aizaki H
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] HCV NS3Protease Mimics TGF-・2and Activates TGF-・Signals via Type I Receptor (2011)
  • 著者名/発表者名: 坂田幸大郎、原詳子、鈴木哲朗、渡邊則幸、相崎英樹、高谷大輔、松本武久、井本正哉、脇田隆字、小嶋聡一
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] C型肝炎ウイルスNS3プロテアーゼによるTGF-βI型受容体を介したTGF-βシグナルの活性化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 坂田幸大郎、原詳子、鈴木哲朗、渡邊則幸、相崎英樹、高谷大輔、松本武久、井本正哉、脇田隆字、小嶋聡一
  • 学会等名: 第25回肝類洞壁細胞研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス研究の進歩と展望 (2011)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 学会等名: 第58回日本感染症学会総会・学術講演会・教育講演
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] HCV感染に伴う宿主細胞の脂質代謝の変化と代謝産物のメタボロミクス解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、鈴木哲朗、脇田隆字
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] 1999年から2009年における日本のC型急性肝炎の発生状況 (2011)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、多田有希、松本善弘、後藤耕司、渡士幸一、鈴木亮介、田中純子、鈴木哲朗、岡部信彦、脇田隆字
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] 国内献血検体を用いたC型肝炎ウイルスパネル検体の作製とウイルス量測定法の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 加藤考宣、村上麻子、政木隆博、相崎英樹
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] ヒト肝細胞癌細胞の3次元培養系は"肝癌モデル"なのか、"肝臓モデル"なのか?-glucose代謝からの検討- (2011)
  • 著者名/発表者名: 松浦知和、丸島秀樹、前橋はるか、大川清、松本善弘、永妻啓介、田中賢、高木一郎、石井雄二、斎藤勝也、政木隆博、相崎英樹
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110000
• [学会発表] Real-time visualization of the ATP level in HCV replicating cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Ando T, Imamura H, Suzuki R, Aizaki H, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 17th International meeting on hepatitis C virus and related viruses
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] Inhibition of cellular squalene synthase impairs hepatitis C virus proliferation in cultured cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Yokohama
  • 学会等名: 17th International meeting on hepatitis C virus and related viruses
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] HCV粒子形成に関与する脂肪滴周辺膜蛋白の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 学会等名: 第46回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] HCV粒子形成と脂質の役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] CVエンベロープタンパク質に付加されるN型糖鎖の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡辺則幸、村山麻子、Saeed Mohsan、伊達朋子、加藤孝宣、相崎英樹、脇田隆字
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス複製複合体におけるATP制御の可視化と機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 安東友美、今村博臣、鈴木亮介、相崎英樹、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス粒子感染における粒子表面のコレステロールの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山本真民、相崎英樹、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] Real-time visualization of the ATP level in HCV replicating cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Ando T, Imamura H, Suzuki R, Aizaki H, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] 分割ユビキチン法を利用したHCVNS2と結合する宿主因子の探索およびウイルス粒子形成への関与 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鈴木亮介、相崎英樹、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] Squalane synthase阻害剤のC型肝炎ウイルス増殖阻害機構の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 斎藤恭子、鈴木哲朗、相崎英樹、花田賢太郎、脇田隆字、西島正弘、深澤征義
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20100000
• [学会発表] Identification of lipid droplet-associated membrane proteins that are involved in HCV production (2009)
  • 著者名/発表者名: Aizaki H, Yamamoto M, Goto K, Fukasawa M, Hanada K, Sato S, Takahashi N, Matsuura Y, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 16^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] Structural requirement of virion-associated cholesterol for HCV morphogenesis and infectivity (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Aizaki H, Goto K, Hamano K, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 16^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] HCV subgenomic replicon replication in human hepatic stellate cell lines (2009)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Aizaki H, Matsuura T, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 16^<th> International Symposium on Hepatitis C Virus & Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] HCV粒子形成に関与する脂肪滴周辺膜蛋白の同定と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、後藤耕司、山本真民、佐藤慈子、高橋信弘、深澤征義、花田賢太郎、松浦善治、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス粒子形成、感染性に重要なコレステロール構造の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山本真民、相崎英樹、宮村達男、濱野国勝、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] C型肝炎ウイルスsubgenomic replicon RNAを複製するヒト肝星細胞株の樹立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡邉則幸、相崎英樹、松浦知和、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス粒子の脂質成分の感染における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、山本真民、後藤耕司、原弘道、森川賢一、谷英樹、松浦善治、斎藤恭子、深澤征義、花田賢太郎、西島正弘、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第16回肝細胞研究会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] 感染性HCV粒子形成における宿主生体膜の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、脇田隆字
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会、シンポジウム
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 学会等名: 第31回日本膜学会、シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [図書] C型肝炎ウイルス(HCV)による感染-日本臨床ウイルス学会、臨床とウイルス (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中純子、小山富子、相崎英樹
  • 総ページ数: 28-35
• [図書] HCV感染における脂HCV感染における脂質代謝の変化とメタボロミクス解析、肝胆膵 (2011)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、脇田隆字
  • 総ページ数: 948-953
• [図書] C型肝炎ウイルスの複製と粒子形成、日本ウイルス学会、雑誌ウイルス (2011)
  • 著者名/発表者名: 鈴木哲朗、原弘道、相崎英樹、鈴木亮介、政木隆博
  • 総ページ数: 87-92
• [図書] HCVの生活環における脂質の役割、日本臨床 (2011)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 総ページ数: 59-63
• [図書] コレステロールとスフィンゴ脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割-ミノファーゲン製薬、Minophagen medical review (2010)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 総ページ数: 1-10
• [図書] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割、日本膜学会誌、膜 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 総ページ数: 259-265
• [備考]
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/ja/from-vir2.html