セリンプロテアーゼのタンパク質基質認識メカニズムの解明

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21750183
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生体関連化学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 上杉 佳子 京都大学, 再生医科学研究所, 研究員 (30416416)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: 酵素 / 基質認識 / 高分子基質 / セリンプロテアーゼ / 放線菌 / RIBSシャフリング

研究概要

セリンプロテアーゼはコラーゲンなどの難分解性タンパク質を分解することから、産業廃棄物利用や血栓症および神経疾患への応用に期待されている。本研究では、Streptomyces omiyaensis由来セリンプロテアーゼ(SOT)をモデル酵素として、高次構造を有するタンパク質基質に対する本酵素群の認識メカニズムを明らかにすることを目的とした。RIBSシャフリング法を用いた詳細な解析により、SOTのTyr71がタンパク質基質の高次構造の認識に、Arg72がコラーゲンとの結合に、Lys217とAla221がフィブリン分解に寄与する残基であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Highly potent fibrinolytic serine protease from Streptomyces. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshiko Uesugi, Hirokazu Usuki, Masaki Iwabuchi, Tadashi Hatanaka
  • 雑誌名: Enzyme and Microbial Technology 48 ページ: 7-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of Tyr71 in Streptomyces trypsin on the recognition mechanism of structural protein substrates. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshiko Uesugi, Hirokazu Usuki, Masaki Iwabuchi, Tadashi Hatanaka
  • 雑誌名: The FEBS Journal 276 ページ: 5634-5646
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular dissection of Streptomyces trypsin on substrate recognition.
  • 著者名/発表者名: Yoshiko Uesugi, Hirokazu Usuki, Jiro Arima, Masaki Iwabuchi, Tadashi Hatanaka
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta (In press.)
  • 査読あり
• [学会発表] 放線菌由来セリンプロテアーゼの血栓溶解に関わるアミノ残基 (2010)
  • 著者名/発表者名: 上杉佳子
  • 学会等名: 第83回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 20101207-20101210
• [学会発表] 放線菌由来セリンプロテアーゼの血栓溶解への応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 上杉佳子
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 20091021-20091024
• [産業財産権] トリプシン様酵素 (2009)
  • 発明者名: 畑中唯史、上杉佳子、西本幸史
  • 権利者名: 畑中唯史、上杉佳子、西本幸史
  • 産業財産権番号: 公開特許公報(A),特許公開2009-171870
  • 取得年月日: 2009-08-06