機能ゲノミクス解析とハイスループット解析を用いた線維性異形成症新規治療法開発

2023 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21H03146
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分57060:外科系歯学関連
• 研究機関: 東京歯科大学
• 研究代表者: 東 俊文 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00222612)
• 研究分担者: 間 奈津子 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (90615379) ; 齋藤 暁子 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (90722835) ; 長山 和亮 茨城大学, 理工学研究科(工学野), 教授 (10359763) ; 村川 泰裕 国立研究開発法人理化学研究所, 生命医科学研究センター, チームリーダー (50765469) ; 野村 武史 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (60328268) ; 中村 貴 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (80431948) ; 溝口 利英 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (90329475) ; 片倉 朗 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (10233743)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: iPS細胞 / GNAS / Gタンパク質 / 悪性腫瘍

研究成果の概要

MacCuneAlbright症候群特異的iPS（MA）のR201H変異を人工的に導入したiPS細胞を作成した。まずR201部分に隣接するかつ　PAM配列をもつガイドRNAとして特異性の高い部位を選定する。EGFP配列とpuromycin耐性配列をつなげたドナーDNAを作成し201番アミノ酸に相当するエクソンの近傍のイントロンにCas9切断部位を決定し、その部位のPAM配列をもつ　ガイドRNAを作成し　全てをelectroporetionによりiPS細胞（Nips）に導入し、puromicinで選別し　その後生存した細胞をFACSにてEGF陽性細胞のみを選別し　MAiPS細胞を確立した。

自由記述の分野

細胞生物学

研究成果の学術的意義や社会的意義

GNAS変異を原因とする多様な腫瘍性病変の病態機序解明の重要なツールとなる。本研究で利用した遺伝子編集技術は今後、同様の手法を応用した疾患特異的iPS細胞作製のあらたな展開を可能にする。　GNASはGタンパク系受容体のシグナル伝達において主要なメカニズムを制御する重要な機構であり　多様な腫瘍発生原因であることが知られ良性腫瘍、膵悪性腫瘍への進展が指摘される　膵嚢胞病変であるIPMNなどはGNAS変異の存在が示唆されており、病態不明良性腫瘍発生病態の解明の端緒となりうる。本論文はさまざまな病態解明にiPS細胞の利用が非常に有用であり汎用性を著しく向上させた点で医学発展に非常に貢献した。