2023 年度研究成果報告書

細胞表層を反応場としたタンパク質間相互作用解析系の構築

研究課題

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研究課題/領域番号	21K05130
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	基金
応募区分	一般
審査区分	小区分34020:分析化学関連
研究機関	九州工業大学
研究代表者	末田慎二九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (00325581)
研究期間 (年度)	2021-04-01 – 2024-03-31
キーワード	タンパク質相互作用解析 / 蛍光イメージング / 培養細胞 / 平衡結合解析
研究成果の概要	本研究では、培養細胞の表層を反応場として利用したタンパク質間相互作用解析系の開発を行った。ここでは、ターゲットとなる標的タンパク質を、膜タンパク質を介して培養細胞の表層に発現させ、そこに蛍光ラベル化したもう一方のタンパク質を添加して、両者の相互作用を蛍光イメージングにより解析する系の構築を行った。実際に本系を利用して平衡結合解析を実施し、タンパク質間相互作用に関する結合パラメーターを算出することに成功した。
自由記述の分野	生物分析化学
研究成果の学術的意義や社会的意義	タンパク質間の詳細な相互作用解析には一般にセンサーチップをベースとした分析手法が活用されているが、この場合、タンパク質を固定化したセンサーチップをうまく調製できない場合があり、このことが解析の妨げとなっている。本手法では培養細胞の表層に標的タンパク質を提示し、その培養細胞の表層でそのまま相互作用解析を実施するため、センサーチップ上への固定化が困難なタンパク質についても解析を行うことが可能である。したがって本手法はこれまで詳細な相互作用解析データの取得が困難であった系に対して有効な解析手法になり得るものと期待される。