| 研究課題/領域番号 |
21K09244
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
菊地 克史 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 非常勤講師 (00602062)
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| 研究分担者 |
佐藤 信吾 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 講師 (40462220)
麻生 義則 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, ジョイントリサーチ講座教授 (50345279)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | PAI-1 / 肉腫 / 増殖 / RNAseq解析 |
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| 研究実績の概要 |
肉腫は化学療法や放射線治療に対する感受性は低く、再発や遠隔転移を発症した肉腫患者の
予後は極めて不良である。肉腫細胞はPAI-1を高発現して、自らの生存、浸潤、転移能など
を担保する。申請者らは新規PAI-１阻害剤TM５６１４が肉腫細胞株増殖を阻害するが正常細胞増殖には影響を与えないことを見出した。本研究では更に発展させ、新規PAI-１阻害薬を用いた新規肉腫治療の可能性を検証することを本研究の目的としている。本年度にはアポトーシス活性に対するTM5614の影響をTUNEL法、Caspase３活性解析を用いて解析した。その結果、TM５６１４は肉腫細胞として用いたU2OS細胞、および正常細胞のコントロールとして用いた滑膜間葉系細胞ともにアポトーシスを誘導しないことが明らかとなった。次に申請者らは、フローサイトメトリー解析法を用いて、細胞周期に対するTM５６１４の影響を解析した。その結果、TM5614はU２OSに対してG２/S arrestを誘導することが明らかとなった。一方、滑膜間葉系細胞の細胞周期には影響を与えなかった。以前よりU２OS細胞、あるいは滑膜間葉系細胞にTM５６１４を作用させ、tRNAを採取してRNAseq解析を行っているが、本年度にはMetascapeを用いてエンリッチメント解析を行った。その結果、U２OS細胞由来RNAサンプルにおいて、細胞周期に影響を与える複数のシグナル経路に集積が認められた。次年度はこれらのデータをもとに、U２OS細胞、間葉系細胞を用いて更に機能解析を進める。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
肉腫細胞RNAseq解析によりＴＭ５６１４のターゲット候補となる有意な結果を得たことは大きな前進である。一方、COVID-19感染流行に伴う研究自粛要請により、当初予定していたマウスを用いたin vivo実験への展開が困難となっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
RNAseq解析によって得られたＴＭ５６１４のターゲット候補となる細胞内シグナルについてU2OS細胞を用いて検証を進める。その成果を、研究計画最終年となる本年度において論文化する。一方、将来でのin vivoの実験展開を目論み、マウスのメイティングなどの準備を、研究自粛要請の解除に伴い進めていきたいと考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額は端数である。次年度に研究用消耗品として充当する。
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