人工染色体ベクターを活用した遺伝子改変動物の開発

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22580320
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 音井 威重 山口大学, 共同獣医学部, 教授 (30311814)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 遺伝子改変動物 / 人工染色体 / クローン / 蛍光タンパク質 / ネコ

研究概要

ネコ胎児線維芽細胞に蛍光タンパク質(GFP)遺伝子を搭載した人工染色体(HAC)ベクターを移入した結果、2 つの細胞系が確立できた。この細胞を核として、除核卵母細胞と融合・再構築した。融合時間(30 および 60 μsec)を比較した結果、短時間(30 μsec)での融合が有意に胚盤胞形成率を増加させた。さらに HAC ベクター細胞由来クローン胚を 13頭のレシピエントに移植した結果、移植後 62 日目に 1 頭の子猫(74g)を作出する事に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Histone deacetylase inhibitor improves the development and acetylation levels of cat cow interspecies cloned embryos (2013)
  • 著者名/発表者名: Wittayarat, M., Sato, Y., Do, T.K.L., Morita, Y., Chatdarong, K., Techakumphu, M., Taniguchi, M. and Otoi, T.
  • 雑誌名: Cellular Reprogramming
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell cycle analysis and interspecies nuclear transfer of cat cells treated with chemical inhibitors (2013)
  • 著者名/発表者名: Wittayarat, M., Fujiwara, A., Chatdarong, K., Techakumphu, M., Sato, Y., Tanihara, F., Morita, Y., Taniguchi, M. and Otoi, T
  • 雑誌名: Acta Veterinaria Hungarica
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effect of relaxin supplementation of in vitro maturation medium on the development of cat oocytes obtained from ovaries stored at 4 °C (2013)
  • 著者名/発表者名: Luu, V.V., Hanatate, K., Tanihara, F., Sato, Y., Do, T.K.L., Taniguchi, M., and Otoi, T.
  • 雑誌名: Reproductive Biology
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of activation ability between feline and bovine oocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanihara, F., Kaedei, Y., Namula, Z., Luu, V.V., Sato, Y., Wittayarat, M., Taniguchi, M. and Otoi, T
  • 雑誌名: Acta Veterinaria Hungarica
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell cycle synchronization of skin fibroblast cells in four species of family Felidae (2013)
  • 著者名/発表者名: Wittayarat, M., Thongphakdee, A., Saikhun, K., Chatdarong, K., Otoi, T.and Techakumphu, M
  • 雑誌名: Reproduction in Domestic Animals 巻: 48 ページ: 305-310
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development and subsequent cryotolerance of domestic cat embryos cultured in serum-free and serum-containing media (2011)
  • 著者名/発表者名: Murakami, M., Dong, Y.J., Suzuki, T., Taniguchi, M., Kaedei, Y., Sato, Y., Tanihara, F. and Otoi, T
  • 雑誌名: Cryobiology 巻: 63 ページ: 170-174
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antiviral restriction factor transgenesis in the domestic cat. (2011)
  • 著者名/発表者名: Wongsrikeao, P., Saenz, D., Rinkoski, T., Otoi, T. and Poeschla, E
  • 雑誌名: Nature Methods 巻: 8 ページ: 853-859
  • 査読あり
• [学会発表] TEffect of trichostatin A on in vitro embryo development of interspecies nuclear transfer embryos reconstructed from cat donor nuclei and bovine cytoplasm. 39th Annual Conference of the IETS (2013)
  • 著者名/発表者名: Wittayarat, M., Namula, Z., Luu, V. V., Do, L. T. K., Sato, Y., Taniguchi, M. and Otoi
  • 学会等名: 39th Annual Conference of the IETS
  • 発表場所: Hannover, Germany
  • 年月日: 2013-01-20
• [学会発表] Effects of ovary storage time on the quality and meiotic competence of cat oocytes (2012)
  • 著者名/発表者名: Luu, V. V., Namula, Z., Kaedei, Y., Tanihara, F. and Otoi, T
  • 学会等名: 38th Annual Conference of the IETS
  • 発表場所: Phoenix, AZ, USA
  • 年月日: 2012-01-08