| 研究課題/領域番号 |
22K11315
|
|---|
| 研究機関 | 札幌医科大学 |
|---|
研究代表者 |
菊池 真 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (20404585)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| キーワード | PC12 / gp-130 / STAT3 / IL-6 |
|---|
| 研究実績の概要 |
令和４年度は、Nerve Growth Factor （NGF)により分化したPC12細胞に対して、IL-6受容体であるgp-130および、細胞内シグナルタンパクである、STAT3およびリン酸化STAT3の発現を観察した。当初、予定していた通り、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養したものを、試料とし、Western blotting法に用いた。その結果、STAT３の発現は観察されたが、gp-130の発現および、STAT3のリン酸化は、ほぼ観察されなかった。その後、培養期間を延長し、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに10日間培養したものを資料に用いた結果、十分なgp-130の発現を観察することができた。
同時に、IL-6による刺激も検討したが、PC12の継代１日後にNGFを加えさらに３日間培養した試料では、STAT3の十分なリン酸化を認めることができなかった。これらのことから、IL-6の影響を観察するためには、受容体であるgp-130の十分な発現が重要であると考えた。現在、IL-6の主たる受容体であるgp-130がPC12継代後どの時点で最大に達するのかを検討するため、PC12細胞の継代およびNGF添加後、３日間、７日間、１０日間培養したものを試料とし、どの時点でgp-130の発現が最大に達するのかを検討中である。
少なくとも、継代・分化誘導後、早期のPC12細胞ではIL-6暴露によるSTAT3のリン酸化は誘導することはできないことが明らかとなった。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
gp-130の発現解析を行うことになり、IL-6が分化PC12細胞に与える影響について検討できていない。加えて、研究者のコロナ罹患により、１カ月ほどの実験がリセットされ、当初予定していた目標を達成できないでいる。
|
| 今後の研究の推進方策 |
gp-130の発現期間を同定したのちに、本研究課題の目的である、IL-6による分化PC12細胞への影響を観察する。最初の観察対象はSTAT3のリン酸化の影響を観察する予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
当該年度、研究代表者がコロナに罹患し、1カ月程度、研究が行えない状況があった。また、当初参加予定であった学会もオンラインなどで開催され、予定していた旅費が次年度使用となった。
今後は、継続した実験の費用、並びに学会参加のための旅費に充てる予定である。
|
