次世代臨床検査法としての新規幹細胞・癌幹細胞検出技術の確立

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23590670
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 高野 徹 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00263236)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: FACS-mQ / flow cytometry / 幹細胞 / 癌幹細胞 / RNA / 遺伝子発現プロフィール

研究概要

次世代臨床検査法の核となると考えられる幹細胞・癌幹細胞の新たな検出法であるFACS-mQ（quantification of mRNA after FACS）の基礎技術の確立に取り組んだ。FACS-mQではRNAを分解させることなしに細胞を蛍光標識することで、その後のFACSによる細胞の分取と遺伝子発現プロフィール解析による細胞の解析を可能とする。本研究の主な成果として１）血液・組織検体からの単一細胞調整法・保存法の確立、２）高感度の細胞蛍光標識法の確立、３）細胞分取後のRNA回収と解析法の確立　が挙げられる。

研究成果

• [雑誌論文] Fetal cell carcinogenesis of the thyroid : A modified theory based on recent evidence (2014)
  • 著者名/発表者名: Takano, T
  • 雑誌名: Endocr J 巻: 61(DN/JST.JSTAGE/endocrj/EJ13-0517 [pii]) ページ: 311-320
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genes that characterize T3-predominant Graves' thyroid tissues (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, C., Ito, M., Yamada, H., Yamakawa, N., Yoshida, H., Date, A., Watanabe, M., Hidaka, Y., Iwatani, Y., Miyauchi, A., Takano, T
  • 雑誌名: Eur J Endocrinol 巻: 168 ページ: 137-144
  • DOI: 10.1530/EJE-12-0507
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preparation of thyroid follicular cells for mRNA quantification after fluorescence-activated cell sorting (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, C., Ito, M., Yamada, H., Yoshida, H., Watanabe, M., Hidaka, Y., Iwatani, Y., Miyauchi, A., Takano, T
  • 雑誌名: Scand J Clin Lab Invest 巻: 173 ページ: 245-252
  • DOI: 10.3109/00365513.2013.769624
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prolonged hybridization with a cRNA probe improves the signal to noise ratio for in-tube in situ hybridization for quantification of mRNA after fluorescence-activated cell sorting (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamada, H., Yamakawa, N., Watanabe, M., Hidaka, Y., Iwatani, Y., Takano, T
  • 雑誌名: Biotech Histochem 巻: 87 ページ: 366-371
  • DOI: 10.3109/10520295.2012.672650
  • 査読あり
• [雑誌論文] Measurement of TFF3 mRNA in aspirates from thyroid nodules using mesh filtration : The first clinical trial in 130 cases (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamada, H., Takano, T., Kihara, M., Hirokaw,a M., Yoshida, H., Watanabe, M., Iwatani, Y., Hidaka, Y., .Miyauchi, A
  • 雑誌名: Endocr J 巻: 59(JST.JSTAGE/endocrj/EJ12-0077 [pii]) ページ: 621-630
  • 査読あり
• [雑誌論文] mRNA quantification after fluorescence activated cell sorting using locked nucleic Acid probes (2011)
  • 著者名/発表者名: Maruo, R.,Yamada, H., Watanabe, M., Hidaka, Y., Iwatani, Y., and Takano, T
  • 雑誌名: Mol Biotechnol 巻: 49 ページ: 42-47
  • DOI: 10.1007/s12033-011-9375-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] An improved protocol for mRNA quantification after fluorescence activated cell sorting with an increased signal to noise ratio in flow cytometry
  • 著者名/発表者名: Date, A., Maeda, T., Watanabe, M., Hidaka, Y., Iwatani, Y., Takano, T
  • 雑誌名: Mol Biotechnol 巻: (in press)
  • DOI: 10.1007/s12033-014-9733-5
  • 査読あり
• [学会発表] Preoperative molecular diagnosis of thyroid nodule (2013)
  • 著者名/発表者名: Takano, T
  • 学会等名: The 2nd Asian Masterclass of Thyroid Cancer
  • 発表場所: Soul, South Korea
  • 年月日: 2013-05-25
  • 招待講演
• [学会発表] 甲状腺濾胞癌の分子診断 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高野徹
  • 学会等名: 第53回日本臨床細胞学会総会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2012-06-02
• [学会発表] 新規幹細胞解析法、FACS-mQによる甲状腺幹細胞・癌幹細胞の同定・解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 髙野徹
  • 学会等名: 第54回日本甲状腺学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-11-22
• [学会発表] 新規臨床検査法、FACS-mQの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 髙野徹, 日高洋, 岩谷良則
  • 学会等名: 第58回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2011-11-18
• [学会発表] 甲状腺腫瘍に対する穿刺吸引核酸診断法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 髙野徹
  • 学会等名: 第54回日本臨床検査医学会近畿支部総会
  • 発表場所: 滋賀
  • 年月日: 2011-10-29
• [備考]
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/labo/www/CRT/CRT%20Home.html