| 研究課題/領域番号 |
23591649
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| 研究機関 | 大分大学 |
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研究代表者 |
波多野 豊 大分大学, 医学部, 講師 (80336263)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| キーワード | PPARα / 表皮角化細胞 / 皮膚バリア機能 / ケモカイン |
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| 研究概要 |
１．バリア関連因子の変化によるPPARα発現に対する影響を検討するため、まず、培養HaCaT細胞におけるフィラグリン遺伝子をsiRNAを用いたノックダウンの条件設定を行ったところ、ノックダウンに成功した。２．培養表皮角化細胞におけるPPARα遺伝子をノックダウンしてアレルギー炎症において重要な役割を担うケモカインであるRANTESの発現について検討したところ、ｍRNAとタンパクの両方においてその発現は亢進した。３．培養HaCaT細胞におけるPPARα遺伝子をノックダウンしてアレルギー炎症において重要な役割を担うケモカインであるTARCの発現について検討したところ、ｍRNAとタンパクの両方においてその発現は亢進した。４．培養表皮角化細胞におけるPPARα遺伝子をノックダウンして皮膚バリア機能構築において重要な役割を担うトランスグルタミナーゼやロリクリンの発現について検討したところ、ｍRNAとタンパクの両方においてその発現は低下した。以上より、バリア関連因子の変化によるPPARα発現変化の解析に必要な基礎的な実験条件が構築されつつあり、PPARα低下のアレルギー炎症関連因子への影響が判明しつつあると考えられる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
培養表皮角化細胞におけるフィラグリンのノックダウンが構築されつつあり、PPARα低下による機能変化が判明しつつあるため。
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| 今後の研究の推進方策 |
１．フィラグリンノックダウンを培養表皮角化細胞においても成功させ、その後条件を検討し、より表皮に近い実験条件を整える。２．１．の後、PPARαの発現を検討する。３．PPARαの発現に対するアレルギー関連因子による影響について検討する。４．PPARαのノックダウンを行った表皮角化細胞の機能解析をさらに進めていく。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
siRNA細胞導入関連 30万円、ヒト角化細胞培養関連消耗品 30万円、各種サイトカインPCR関連 25万円、蛋白解析用抗体 25万円、ECLシステム関連 10万円などで、120万円程度の使用を計画している。
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