機能的セルトリ細胞の長期培養系の確立

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659095
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 篠原 隆司 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30322770)
• キーワード: セルトリ細胞 / 精子形成

研究概要

昨年度にセルトリ細胞の長期培養系を開発し、そこでは精子幹細胞を含んだ精子形成細胞が敷石状のコロニー(cobblestone colony)を形成して増殖することを明らかにした。本年度は、このマウスで出来上がった培養系をラットでも利用できるのかを検討した。
ラット由来のせルトリ細胞をマウスと同じ方法で酵素処理を行い、マイトマイシン処理を行った後にGS細胞をプレーティングした。細胞を添加した直後にはcobblestone 状のコロニーの形成を認めることができた。しかしながら、マウスの場合と異なり、cobblestone colonyを長期にわたり維持することができなかった。この原因は明らかではないが、一つの可能性としてはラットとマウスの増殖要求性が異なっていることためかと思われる。また、ラット精巣の培養の場合には、マウスに比較するとセルトリ細胞以外の体細胞の増殖が著しいために、セルトリ細胞よりもこれらの細胞が相対的に多くなってしまう。これが原因で生殖細胞に必要な栄養因子の供給が悪くなってしまうために、cobblestoneコロニーの形成が時間と共に悪化している可能性もあるのではないかと考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Cell-cycle-dependent Colonization of Mouse Spermatogonial Stem Cells After Transplantation into Seminiferous Tubules. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishii K, Kanatsu-Shinohara M, Shinohara T.
  • 雑誌名: J Reprod Dev. 巻: 60 ページ: 37-46.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enrichment of mouse spermatogonial stem cells based on aldehyde dehydrogenase activity. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Mori Y, Shinohara T.
  • 雑誌名: Biol Reprod. 巻: 89 ページ: 140
  • DOI: doi: 10.1095/biolreprod.113.114629.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spermatogonial stem cell self-renewal and development. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanatsu-Shinohara M, Shinohara T.
  • 雑誌名: Annu Rev Cell Dev Biol. 巻: 29 ページ: 163-87.
  • DOI: 10.1146/annurev-cellbio-101512-122353.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of pluripotency in male germline stem cells by Dmrt1. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Hirose M, Ogonuki N, Ebisuya M, Inoue K, Kanatsu-Shinohara M, Tanaka T, Nishida E, Ogura A, Shinohara T.
  • 雑誌名: Genes Dev. 巻: 27 ページ: 1949-58.
  • DOI: 10.1101/gad.220194.113.
  • 査読あり
• [雑誌論文] ROS are required for mouse spermatogonial stem cell self-renewal. (2013)
  • 著者名/発表者名: Morimoto H, Iwata K, Ogonuki N, Inoue K, Atsuo O, Kanatsu-Shinohara M, Morimoto T, Yabe-Nishimura C, Shinohara T.
  • 雑誌名: Cell Stem Cell. 巻: 12 ページ: 774-86.
  • DOI: 10.1016/j.stem.2013.04.001.
  • 査読あり