血液中遊離ＤＮＡの腫瘍マーカーとしての実用化ーＬＩＮＥ１を中心として

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24300337
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 須並 英二 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (70345205)
• 研究分担者: 津野 寛和 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (50282637) ; 川合 一茂 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (80571942)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 大腸癌 / バイオマーカー / 血中遊離DNA / LINE1

研究実績の概要

担癌患者の末梢血遊離DNA は癌組織に由来して健常人より高濃度に存在し、様々な遺伝子解析に応用されている。癌のepigeneticな変化として重要なglobal hypomethylationに注目し、大腸癌患者の血漿中遊離DNAのメチル化レベルを定量し、臨床的有用性を検討した。
2012年4月から2014年7月に切除術を施行した大腸癌患者112人、対照群として健常人30人より血漿を採取した。遊離DNAはフェノール・クロロホルム法で抽出し、濃度をPicoGreen assayで定量した。メチル化レベルはLINE-1遺伝子のpromotor領域(148bp)を対象に、バイサルファイト処理後、absolute quantitative analysis of methylated alleles realtime PCR (AQAMA)によって定量した。LINE-1 hypomethylation index (LHI) をunmethylation copy number / methylation + unmethylation copy numberと定義し解析に用いた。
大腸癌患者の血漿遊離DNA量および血漿LHIは健常人より有意な上昇を示した(遊離DNA：16.1 ± 9.72 ng/ml vs 11.3 ± 3.41 ng/ml, P = 0.0014、血漿LHI：0.33 ± 0.029 vs 0.37 ± 0.042, P < 0.0001)。臨床病理学的因子の検討では腫瘍長径と血漿LHIの間に弱いが有意な相関を認めた(r = 0.19, P = 0.039)。一方、遠隔転移例で血漿LHIが高い傾向があったが(P = 0.096)、Stage I-IV間で有意差は無かった。組織中のhypomethylationは腫瘍進展の早期より生じるとする報告があり、同様の傾向を血漿遊離DNAが反映する可能性を示唆した。健常人と癌患者を識別するスクリーニング検査としての有用性はROC曲線で評価し、血漿遊離DNA量は至適カットオフ値12.1ng/ml 、感度 67.0%、特異度66.7%、AUC 0.69、血漿LHIは至適カットオフ値0.36、感度67.0%、特異度86.7%、AUC 0.82と計算され、AUCの比較では血漿LHIが有意に優れた (P = 0.048)。
結論として血漿LHIは大腸癌を早期発見可能な腫瘍マーカーとして有用である可能性が示唆された。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Prediction of the preoperative chemoradiotherapy response for rectal cancer by peripheral blood lymphocyte subsets. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tada N, Kawai K, Tsuno NH, Ishihara S, Yamaguchi H, Sunami E, Kitayama J, Oba K, Watanabe T.
  • 雑誌名: World J Surg Oncol 巻: 13 ページ: 30
  • DOI: 10.1186/s12957-014-0418-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphatidylserine-specific phospholipase A1 (PS-PLA1) expression in colorectal cancer correlates with tumor invasion and hematogenous metastasis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iida Y, Sunami E, Yamashita H, Hiyoshi M, Ishihara S, Yamaguchi H, Inoue A, Makide K, Tsuno NH, Aoki J, Kitayama J, Watanabe T.
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 35 ページ: 1459-64
  • 査読あり
• [雑誌論文] A phase I dose escalation study of oxaliplatin plus oral S-1 and pelvic radiation in patients with locally advanced rectal cancer (SHOGUN trial). (2015)
  • 著者名/発表者名: Ishihara S, Matsusaka S, Kondo K, Horie H, Uehara K, Oguchi M, Murofushi K, Ueno M, Mizunuma N, Shinbo T, Kato D, Okuda J, Hashiguchi Y, Nakazawa M, Sunami E, Kawai K, Yamashita H, Okada T, Ishikawa Y, Nakajima T, Watanabe T.
  • 雑誌名: Radiat Oncol 巻: 10 ページ: 24
  • DOI: 10.1186/s13014-015-0333-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nomogram prediction of metachronous colorectal neoplasms in patients with colorectal cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawai K, Ishihara S, Yamaguchi H, Sunami E, Kitayama J, Miyata H, Watanabe T.
  • 雑誌名: Ann Surg 巻: 261 ページ: 926-32
  • DOI: 10.1097/SLA.0000000000000881
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic Significance of the Lymph Node Ratio in Stage IV Colorectal Cancer Patients who have Undergone Curative Resection. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Ishihara S, Nishikawa T, Tanaka T, Tanaka J, Kiyomatsu T, Hata K, Kawai K, Nozawa H, Kanazawa T, Kazama S, Yamaguchi H, Sunami E, Kitayama J, Watanabe T.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 22 ページ: 1513-9
  • DOI: 10.1245/s10434-014-4184-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of carcinoembryonic antigen mRNA in peritoneal lavage by the transcription-reverse transcription concerted method indicates poor prognosis in patients with stage II and III colon cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Murono K, Kazama S, Yamaguchi H, Kawai K, Ishihara S, Sunami E, Kitayama J, Satoh Y, Kurihara M, Yatomi Y, Watanabe T.
  • 雑誌名: Surgery 巻: 157 ページ: 322-30
  • DOI: 10.1016/j.surg.2014.09.015
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characteristics and prognosis of colorectal cancer associated with rheumatic disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kishikawa J, Kawai K, Tsuno N, Yamaguchi H, Ishihara S, Sunami E, Watanabe T.
  • 雑誌名: Int Surg 巻: [Epub ahead of print ページ: Epub
  • 査読あり
• [雑誌論文] Incidence and prognostic significance of positive peritoneal lavage in colorectal cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa T, Sunami E, Tanaka T, Tanaka J, Kiyomatsu T, Kawai K, Hata K, Kazama S, Nozawa H, Ishihara S, Watanabe T.
  • 雑誌名: Surg Today 巻: Epub ahead of print ページ: Epub
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proximal shift of colorectal cancer along with aging. (2014)
  • 著者名/発表者名: Iida Y, Kawai K, Tsuno NH, Ishihara S, Yamaguchi H, Sunami E, Kitayama J, Watanabe T.
  • 雑誌名: Clin Colorectal Cancer 巻: 13 ページ: 213-8
  • DOI: 10.1016/j.clcc.2014.06.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic impact of primary tumor resection and lymph node dissection in stage IV colorectal cancer with unresectable metastasis: a propensity score analysis in a multicenter retrospective study. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishihara S, Hayama T, Yamada H, Nozawa K, Matsuda K, Miyata H, Yoneyama S, Tanaka T, Tanaka J, Kiyomatsu T, Kawai K, Nozawa H, Kanazawa T, Kazama S, Yamaguchi H, Sunami E, Kitayama J, Hashiguchi Y, Sugihara K, Watanabe T.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 21 ページ: 2949-55
  • DOI: 10.1245/s10434-014-3719-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nuclear Notch3 expression is associated with tumor recurrence in patients with stage II and III colorectal cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Kazama S, Akiyoshi T, Murono K, Yoneyama S, Tanaka T, Tanaka J, Kiyomatsu T, Kawai K, Nozawa H, Kanazawa T, Yamaguchi H, Ishihara S, Sunami E, Kitayama J, Morikawa T, Fukayama M, Watanabe T.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 21 ページ: 2650-8
  • DOI: 10.1245/s10434-014-3659-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Drug development for intraperitoneal chemotherapy against peritoneal carcinomatosis from gastrointestinal cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Emoto S, Sunami E, Yamaguchi H, Ishihara S, Kitayama J, Watanabe T.
  • 雑誌名: Surg Today 巻: 44 ページ: 2209-20
  • DOI: 10.1007/s00595-014-0848-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in the plasma levels of cytokines/chemokines for predicting the response to chemoradiation therapy in rectal cancer patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tada N, Tsuno NH, Kawai K, Murono K, Nirei T, Ishihara S, Sunami E, Kitayama J, Watanabe T.
  • 雑誌名: Oncol Rep 巻: 31 ページ: 463-71
  • DOI: 10.3892/or.2013.2857
  • 査読あり
• [学会発表] 大腸癌患者におけるLINE-1を標的とした血漿遊離DNAメチル化レベルの定量と臨床的有用性の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 永井雄三、須並英二
  • 学会等名: 第70回日本消化器外科学会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2015-07-15 – 2015-07-17