ＡＤＡＭ１７を介するＳｈｅｄｄｉｎｇ制御機構とレムナントペプチドシグナルの解析

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24390074
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 東山 繁樹 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 教授 (60202272)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: Shedding / ADAM17 / HB-EGF / amphiregulin / TNF-alpha / annexin / 細胞膜蛋白質

研究実績の概要

様々な細胞外情報のアンテナとなる細胞膜貫通蛋白質の量的・質的制御には、細胞膜上での蛋白質限定分解（Ectodomain Shedding; 以後Sheddingと記す）が極めて重要な役割を果たす。その主役をなすのが、Shedding酵素ADAM17である。我々はこれまで、膜型増殖因子EGFファミリーのshedding解析から、新たなShedding制御因子としてannexins (ANXs) を同定した。さらに、この ANXs はADAM17と相互作用し、ADAM17によるI型およびII型一回膜貫通蛋白質のShedding を全く逆に制御することを見出した。この結果を基に、本研究では、 ANXs によるADAM17触媒ドメインのヘッドスウィングモデルを提案・検証し、その実証に挑む。昨年度開発したshedding反応を生体で捉えるためのイメージングプローブを利用し、本年度は、１細胞レベルでのANXs によるADAM17触媒ドメインのヘッドスウィングモデルの検証を試みた。ADAM17、proHB-EGF-AP＆ADAM17、proHB-EGF-AP＆ADAM17ノックダウン(KD)、proTNF-α－AP＆ADAM17、proTNF-α－AP＆ADAM17KDをそれぞれ単独で安定発現するMCF7細胞株を樹立し、ADAM17細胞とproHB-EGF-AP＆ADAM17KD細胞、ADAM17細胞とproTNF-α－AP＆ADAM17KD細胞の混合培養と、proHB-EGF-AP＆ADAM17およびproTNF-α－AP＆ADAM17単独培養にて、インビボイメージング解析を行った。その結果、ADAM17触媒ドメインのヘッドスウィングモデルを支持すデーターを得た。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Cell motion predicts human epidermal stemness. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nanba D, Toki F, Tate S, Imai M, Matsushita N, Shiraishi K, Sayama K, Toki H, Higashiyama S, Barrandon Y.
  • 雑誌名: J Cell Biol. 巻: 209 ページ: 305-315
  • DOI: 10.1083/jcb.201409024.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] ADAM17 promotes proliferation of collecting duct kidney epithelial cells through ERK activation and increased glycolysis in polycystic kidney disease. (2014)
  • 著者名/発表者名: Beck Gooz M, Maldonado EN, Dang Y, Amria MY, Higashiyama S, Abboud HE, Lemasters JJ, Bell PD.
  • 雑誌名: Am J Physiol Renal Physiol. 巻: 307 ページ: F551-F559
  • DOI: 10.1152/ajprenal.00218.2014.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Induction of amphiregulin by p53 promotes apoptosis via control of microRNA biogenesis in response to DNA damage. (2014)
  • 著者名/発表者名: Taira N, Yamaguchi T, Kimura J, Lu ZG, Fukuda S, Higashiyama S, Ono M, Yoshida K.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 巻: 111 ページ: 717-722
  • DOI: 10.1073/pnas.1313675111.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] EGFファミリーの増殖因子による乳腺細胞の細胞間接着制御機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 福田 信治，福田(西田)尚代，東山繁樹
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] EGF受容体シグナルによる乳腺細胞の可逆的な表現型変換の制御機構解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 福田(西田) 尚代，福田 信治，東山繁樹
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 乳がん細胞における形質転換とproHB-EGFのエクトドメインシェディングの相関性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 河村勇志,田中涼果、難波大輔、東山繁樹
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会 シンポジウム
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [備考] 愛媛大学大学院医学系研究科 生化学・分子遺伝学分野ホームページ
  • URL: http://www.m.ehime-u.ac.jp/school/biochem2/
• [備考] 愛媛大学プロテオサイエンスセンター 細胞増殖・腫瘍制御部門
  • URL: http://www.pros.ehime-u.ac.jp/section/06.html