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アルツハイマー病の発症に関与しているカルパインを異常活性化させたカルパスタチン遺伝子欠損マウスと野生型マウスの海馬の初代培養細胞を使用して、カルパインの生体内基質の同定を試みた。回収した細胞抽出液を4つの画分に分画後、蛍光二次元電気泳動法により解析した。またカルパイン結合カラムを作製し、4つの画分を添加し、吸着したタンパク質を電気泳動後、銀染色したタンパク質スポットをゲルから切り出し、酵素消化後、質量分析によりタンパク質同定を行った。さらに同定したカルパインの生体内基質の可能性があるタンパク質の特異的抗体を使用してウェスタンブロッティングを行い、動態を解析した。
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