| 研究課題/領域番号 |
25461702
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 研究機関 | 鹿児島大学 |
|---|
研究代表者 |
金蔵 拓郎 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (70177509)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| キーワード | CD147/basigin / ERシグナル / オートファジー / EGFR |
|---|
| 研究概要 |
一般に細胞内に異常タンパクが蓄積すると変性疾患や腫瘍が生じる。異常タンパクに対する防禦機構としてアポトーシス、ER シグナル、オートファジーの研究が進み、近年ではプログラムされたネクローシス、いわゆるネクロプトーシスが注目されている。
CD147/basiginは細胞膜分子の発現をサポートするシャペロン様の機能を有し、アポトーシスから腫瘍細胞を保護する作用がある。このことからCD147/basiginが細胞防御機構に関与することで腫瘍細胞の生存調節因子として機能している可能性が考えられ、CD147/basiginとアポトーシス、ERシグナルおよびオートファジーとの関連を解明することを目的に本研究を計画した。
我々は研究対象として悪性黒色腫細胞を用いている。悪性黒色腫の約70％ではEGFRの下流の分子であるBRAFに遺伝子変異がみられ、EGFR-BRRF-MAPKの径路が恒常的に活性化しており、新たな分子標的薬vemurafenibは変異BRAFを標的としている。平成25年度に我々は、この生存シグナルであるEGFRとCD147/basiginの関係を検討した。EGFRもCD147/basiginも黒色腫細胞の増殖を促進させるが、予想に反してCD147/basiginをノックダウンするとEGFRのリン酸化は亢進した。これはCD147/basiginのノックダウンによりEGFRに対して抑制性に作用するcdc25Cと、そのリン酸化を調節するMEKのリン酸化が抑制されるためであることを明らかにした。この知見は生存シグナル間にクロストークが存在すること、及びEGFRとCD147/basigin双方を抑制することでより効果的に腫瘍細胞の増殖を抑制できることを示している。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
CD147/basiginの腫瘍細胞の生存調節因子としての機能の解明を目的として本研究を計画した。特にアポトーシス、ER シグナル、オートファジー等の細胞死の調節に重点を置いて研究計画を立案した。一方で我々はこれまでにCD147/basiginは多機能を有する分子で、そのメカニズムとして細胞膜分子の正常な発現をサポートするシャペロン様機能を有することを明らかにしてきた。中南大学（中華人民共和国）の研究協力者らはCD147/basiginと結合する膜分子のスクリーニングを行ない、その結果、悪性黒色腫細胞の増殖に重要な役割を果たすEGFRもその一つであることが解った。EGFR-BRAF-MEKの系は悪性黒色腫の治療標的として臨床的にも注目を集めているためCD147/basiginとEGFRの関係を検討するに至った。
本来の研究計画には示さなかったが、極めて関連の深い情報伝達機構であり「研究実績の概要」に記したように重要な知見が得られた。26年度からは本来の研究計画に沿った研究を進める。
|
| 今後の研究の推進方策 |
CD147/basiginが悪性黒色腫細胞のアポトーシス、ERシグナル、オートファジーに関与しているかどうかを明らかにする。CD147/basiginを発現している悪性黒色腫細胞株にsiRNAを遺伝子導入することでCD147/basiginノックダウン細胞を作製し、発現細胞と非発現細胞の間でアポトーシス、ERシグナル、オートファジーの状態を比較する。また悪性黒色腫では解糖系が亢進し細胞外微小環境が酸性化することが腫瘍細胞のviabilityに影響していること、酸化刺激が腫瘍の進展に深く関わっていることが報告されているので、細胞を酸性条件下で培養した場合および酸化刺激を加えた際のアポトーシス、ERシグナル、オートファジー反応の変化も両者で比較する。本研究で得られる知見を基にCD147/basigin の腫瘍細胞の生存調節因子としての機能を解明する。またモデルマウスを用いたin vivoの実験を行なう。
なお、25年度の研究でCD147/basiginノックダウン細胞株を樹立できたのでこれを用いて研究を進める。
|
| 次年度の研究費の使用計画 |
上述のように当初の研究計画と密接に関連はしているが計画書には記載しなかった研究を行なったため使用計画通りに支出がなされなかった。
次年度以降は当初計画書通りに予算を執行する。
|
