ペプチド性分子治療を目指したがん抑制遺伝子機能回復型抗腫瘍ペプチド創成への挑戦

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670263
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 近藤 英作 新潟大学, 医歯学系, 教授 (30252951)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: ペプチド / 癌抑制遺伝子 / p14ARF / 分子治療

研究実績の概要

生物学的に高悪性度の難治性悪性腫瘍では、高頻度にがん抑制遺伝子機能の喪失が認められ、これががんの自律性増殖の大きな要因となっている。このようながん抑制遺伝子の代表のひとつとしてp14ARFが知られている。私たちは最近の研究成果で、p14ARFのがん細胞増殖抑制機能を代償性に回復する重要アミノ酸配列を同定した。本研究ではこの成果をもとに生体応用に向けた抗腫瘍性p14ARFの最適デザイン化を行い、新規“制がんペプチド医薬”の基盤創成を目的とした。初年度はp14ARF機能性ペプチドの削り込みによるコア配列の明確な同定と機能増強のための構造改変技術の検討した（p14ARF機能性ペプチドの最適デザイン化）。結果として、準備研究で得ていたp14機能回復型の全２７アミノ酸配列から１２アミノ酸コア配列を同定し、さらにがん細胞内でのみ機能性ペプチド配列を単独型に開裂させるクリベージモチーフの挿入に成功し、最終機能型ペプチドr9-CB-p14MISを獲得した。さらに最終年度（第２年目）は、腫瘍選択的標的を可能とする制がん用ペプチドとして担癌モデルマウスを用いた基本実験による実効的なペプチドの抗腫瘍効果を確認できた。（細胞レベルアッセイから生体腫瘍モデルアッセイの実施による検証。）
本研究期間を通じてin vivo studyによるトランスレーショナル研究として以下の２点が基盤的に実証できた。
１．私たちの同定したp14ARFの機能性基本配列は、p14発現を維持する正常細胞系への影響が最小限におさえられ、正常細胞に対する増殖抑制や細胞死誘導がほとんど見られない点で治療用分子として卓越している。
２．p14ARFの不活化は、p53やp16INK4a, p21CIP1などと同様に、多種類のヒト高悪性度腫瘍で起こっているために、当開発ペプチドは多系統のがんに幅広い応用性が期待できる。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of a novel cell-penetrating peptide targeting human glioblastoma cell lines as a cancer-homing transporter. (2015)
  • 著者名/発表者名: Higa M, Katagiri C, Shimizu-Okabe C, Tsumuraya T, Sunagawa M, Nakamura M, Ishiuchi S, Takayama C, Kondo E, Matsushita M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 457(2) ページ: 206-12
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.12.089.
  • 査読あり
• [雑誌論文] NF-κB factors control the induction of NFATc1 in B lymphocytes. (2014)
  • 著者名/発表者名: Muhammad K, Alrefai H, Marienfeld R, Pham DA, Murti K, Patra AK, Avots A, Bukur V, Sahin U,Kondo E, Klein-Hessling S, Serfling E.
  • 雑誌名: Eur J Immunol. 巻: 44(11) ページ: 3392-402.
  • DOI: 10.1002/eji.201444756.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Deficient HER3 expression in poorly-differentiated colorectal cancer cells enhances gefitinib sensitivity. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakata S, Tanaka H, Ito Y, Hara M, Fujita M, Kondo E, Kanemitsu Y, Yatabe Y, Nakanishi H.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 45(4) ページ: 1583-93
  • DOI: 10.3892/ijo.2014.2538
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extract of Cordyceps militaris inhibits angiogenesis and suppresses tumor growth of human malignant melanoma cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ruma IMW, Putranto EW, Kondo E, Watanabe R, Saito K, Inoue Y, Yamamoto K, Nakata S,Kaihata M, Murata H and Sakaguchi M.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 45(1) ページ: 209-18
  • DOI: 10.3892/ijo.2014.2397.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Coxsackie and adenovirus receptor is a critical regulator for the survival and growth of oral squamous carcinoma cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Saito K, Sakaguchi M, Iioka H, Matsui M, Nakanishi H, Huh NH and Kondo E.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 33(10) ページ: 1274-86
  • DOI: 10.1038/onc.2013.66.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a New Rapid Isolation Device for Circulating Tumor Cells (CTCs) Using 3D Palladium Filter and Its Application for Genetic Analysis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yusa A, Toneri T, Masuda T, Ito S, Yamamoto S, Okochi M, Kondo N, Iwata H, Yatabe Y, Ichinosawa Y, Kinuta S, Kondo E, Honda H, Arai F, Nakanishi H.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 9(2) ページ: 1-12
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0088821.
  • 査読あり
• [雑誌論文] New whole-body multimodality imaging of gastric cancer peritoneal metastasis combining fluorescence imaging with ICG-labeled antibody and MRI in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ito A, Ito Y, Matsushima S, Tsuchida D, Ogasawara M, Hasegawa J, Misawa K, Kondo E, Kaneda N, Nakanishi H.
  • 雑誌名: Gastric Cancer. 巻: 17(3) ページ: 497-507
  • DOI: 10.1007/s10120-013-0316-0.
  • 査読あり
• [学会発表] p14機能性ペプチドによる高悪性度腫瘍の増殖抑制 (2014)
  • 著者名/発表者名: 近藤英作、齋藤憲
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2014-09-26 – 2014-09-28
• [学会発表] 胆道がんにおける腫瘍ホーミングペプチドの開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 齋藤憲、近藤英作
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2014-09-26 – 2014-09-28
• [学会発表] 細胞極性制御因子Crb3の腫瘍の進展における機能の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 飯岡英和、齋藤憲、森井英一、近藤英作
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2014-09-26 – 2014-09-28
• [学会発表] 肝および腹膜転移性胃がんの原発巣ならびに転移巣におけるHER2/EGFR発現の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 齊藤卓也、中西速夫、谷田部恭、伊藤誠二、山道啓吾、近藤英作
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2014-09-26 – 2014-09-28
• [学会発表] p14ARF機能性ペプチドによる悪性腫瘍細胞の増殖抑制 (2014)
  • 著者名/発表者名: 近藤英作、齋藤憲
  • 学会等名: 第18回日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2014-06-25 – 2014-06-27
• [図書] G.I. Research 特集 消化器腫瘍の分子イメージング (2014)
  • 著者名/発表者名: 近藤英作
  • 総ページ数: 112
  • 出版者: 先端医学社
• [備考] http://www.med.niigata-u.ac.jp/pa2/